布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶基因的原核表达与鉴定
포로씨균린산포도당변위매기인적원핵표체여감정
Expression and Identification of Phosphoglucomutase Gene of Brucella
  • 万方数据
    石河子大学学报（自然科学版） 석하자대학학보（자연과학판）
    JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
    2013年 1期 35-38 ,共4页

    张豫%张辉%张艳%陈瑞花%王震%桂丹%孙志华%陈创夫

    장예%장휘%장염%진서화%왕진%계단%손지화%진창부

    布鲁氏菌%pgm基因%原核表达 佈魯氏菌%pgm基因%原覈錶達
    포로씨균%pgm기인%원핵표체
    对布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶(pgm)蛋白进行了表达与纯化,为研究该基因的功能提供了物质基础.首先利用PCR方法从羊种布鲁氏菌基因组DNA中PCR法扩增pgm基因,并将该基因亚克隆至pET-28a(+)载体中,转化人大肠杆菌(DE3),诱导表达融合蛋白；表达产物经Ni-NTA Agarose亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果显示:扩增了pgm的全基因,成功构建了布鲁氏菌pgm基因的原核表达载体pET-28a(+)-pgm,并且在大肠杆菌中进行了表达,经Western blot鉴定,该蛋白可以与布鲁氏菌免疫血清产生特异性结合反应,且具有良好的免疫反应性.本研究为进一步研究布鲁氏菌pgm蛋白的生物学功能提供基础物质,也为进一步开发基因工程疫苗提供理论基础.
    대포로씨균린산포도당변위매(pgm)단백진행료표체여순화,위연구해기인적공능제공료물질기출.수선이용PCR방법종양충포로씨균기인조DNA중PCR법확증pgm기인,병장해기인아극륭지pET-28a(+)재체중,전화인대장간균(DE3),유도표체융합단백；표체산물경Ni-NTA Agarose친화층석순화후,진행SDS-PAGE화Western blot분석.결과현시:확증료pgm적전기인,성공구건료포로씨균pgm기인적원핵표체재체pET-28a(+)-pgm,병차재대장간균중진행료표체,경Western blot감정,해단백가이여포로씨균면역혈청산생특이성결합반응,차구유량호적면역반응성.본연구위진일보연구포로씨균pgm단백적생물학공능제공기출물질,야위진일보개발기인공정역묘제공이론기출.
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