生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2013年
1期
45-48
,共4页
刚地弓形虫%微线体蛋白2%胞质尾%多克隆抗体
剛地弓形蟲%微線體蛋白2%胞質尾%多剋隆抗體
강지궁형충%미선체단백2%포질미%다극륭항체
目的:制备弓形虫微线体蛋白2胞质尾段(MIC2C)蛋白片段及其多克隆抗体.方法:以弓形虫cDNA文库为模板,PCR扩增135bp MIC2C基因片段,构建MIC2C/pGEX-4T-1原核表达系统；IPTG诱导表达GST-MIC2C融合蛋白；用纯化的融合蛋白加免疫佐剂背部皮内注射免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,亲和层析纯化并分析抗体的效价.结果:构建了MIC2C原核表达系统,表达并纯化了GST-MIC2C融合蛋白,蛋白的浓度为3.07mg/ml；获得了抗该蛋白的兔源性抗血清,纯化后的多克隆抗体效价为1∶16000.结论:在体外制备并纯化了GST-MIC2C融合蛋白及其多克隆抗体,为后续弓形虫入侵机制的研究奠定了基础.
目的:製備弓形蟲微線體蛋白2胞質尾段(MIC2C)蛋白片段及其多剋隆抗體.方法:以弓形蟲cDNA文庫為模闆,PCR擴增135bp MIC2C基因片段,構建MIC2C/pGEX-4T-1原覈錶達繫統；IPTG誘導錶達GST-MIC2C融閤蛋白；用純化的融閤蛋白加免疫佐劑揹部皮內註射免疫新西蘭兔,製備多剋隆抗體,親和層析純化併分析抗體的效價.結果:構建瞭MIC2C原覈錶達繫統,錶達併純化瞭GST-MIC2C融閤蛋白,蛋白的濃度為3.07mg/ml；穫得瞭抗該蛋白的兔源性抗血清,純化後的多剋隆抗體效價為1∶16000.結論:在體外製備併純化瞭GST-MIC2C融閤蛋白及其多剋隆抗體,為後續弓形蟲入侵機製的研究奠定瞭基礎.
목적:제비궁형충미선체단백2포질미단(MIC2C)단백편단급기다극륭항체.방법:이궁형충cDNA문고위모판,PCR확증135bp MIC2C기인편단,구건MIC2C/pGEX-4T-1원핵표체계통；IPTG유도표체GST-MIC2C융합단백；용순화적융합단백가면역좌제배부피내주사면역신서란토,제비다극륭항체,친화층석순화병분석항체적효개.결과:구건료MIC2C원핵표체계통,표체병순화료GST-MIC2C융합단백,단백적농도위3.07mg/ml；획득료항해단백적토원성항혈청,순화후적다극륭항체효개위1∶16000.결론:재체외제비병순화료GST-MIC2C융합단백급기다극륭항체,위후속궁형충입침궤제적연구전정료기출.
