生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2013年
1期
34-37
,共4页
L-阿拉伯糖异构酶%毕赤酵母%基因表达%酶活性%D-塔格糖
L-阿拉伯糖異構酶%畢赤酵母%基因錶達%酶活性%D-塔格糖
L-아랍백당이구매%필적효모%기인표체%매활성%D-탑격당
目的:用毕赤酵母表达L-阿拉伯糖异构酶.方法:用PCR法扩增大肠杆菌的L-阿拉伯糖异构酶基因,构建含L-阿拉伯糖异构酶基因的毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K-ai.通过电转法将pPIC9K-ai转化毕赤酵母GS115基因组.先筛选出高G418抗性的克隆,然后再从高拷贝的克隆中筛选出高表达重组L-阿拉伯糖异构酶的重组子作为工程菌GS115(pPIC9K-ai).结果:在甲醇诱导下,摇瓶发酵GS115(pPIC9K-ai)3d,分泌表达L-阿拉伯糖异构酶32 mg/L.结论:毕赤酵母表达的L-阿拉伯糖异构酶具有转化D-半乳糖为D-塔格糖的生物活性.每升GS115(pPIC9K-ai)发酵液能转化D-半乳糖生成30 mgD-塔格糖.
目的:用畢赤酵母錶達L-阿拉伯糖異構酶.方法:用PCR法擴增大腸桿菌的L-阿拉伯糖異構酶基因,構建含L-阿拉伯糖異構酶基因的畢赤酵母分泌型錶達載體pPIC9K-ai.通過電轉法將pPIC9K-ai轉化畢赤酵母GS115基因組.先篩選齣高G418抗性的剋隆,然後再從高拷貝的剋隆中篩選齣高錶達重組L-阿拉伯糖異構酶的重組子作為工程菌GS115(pPIC9K-ai).結果:在甲醇誘導下,搖瓶髮酵GS115(pPIC9K-ai)3d,分泌錶達L-阿拉伯糖異構酶32 mg/L.結論:畢赤酵母錶達的L-阿拉伯糖異構酶具有轉化D-半乳糖為D-塔格糖的生物活性.每升GS115(pPIC9K-ai)髮酵液能轉化D-半乳糖生成30 mgD-塔格糖.
목적:용필적효모표체L-아랍백당이구매.방법:용PCR법확증대장간균적L-아랍백당이구매기인,구건함L-아랍백당이구매기인적필적효모분비형표체재체pPIC9K-ai.통과전전법장pPIC9K-ai전화필적효모GS115기인조.선사선출고G418항성적극륭,연후재종고고패적극륭중사선출고표체중조L-아랍백당이구매적중조자작위공정균GS115(pPIC9K-ai).결과:재갑순유도하,요병발효GS115(pPIC9K-ai)3d,분비표체L-아랍백당이구매32 mg/L.결론:필적효모표체적L-아랍백당이구매구유전화D-반유당위D-탑격당적생물활성.매승GS115(pPIC9K-ai)발효액능전화D-반유당생성30 mgD-탑격당.
