生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2013年
1期
16-19
,共4页
Rab GDP解离抑制因子%转染%定位%表达
Rab GDP解離抑製因子%轉染%定位%錶達
Rab GDP해리억제인자%전염%정위%표체
目的:构建含人GDI1和GDI2基因的真核表达载体进行定位和蛋白表达研究.方法:用PCR从U251细胞cDNA克隆GDI1和GDI2基因,构建真核表达载体pEGFP-N2-GDI1和pEGFP-N2-GDI2,转染HEK293T细胞.荧光显微镜观察GDI1和GDI2蛋白的细胞内定位,再通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定蛋白的表达.结果:成功克隆到1 341bp和1 335bp的人源GDI1和GDI2基因,并准确插入真核表达载体pEGFP-N2中,荧光观察这两个蛋白定位到细胞浆中,并能利用标签抗体检测到GDI1和GDI2的表达.结论:GDI1和GDI2能够定位到细胞浆,并能通过Western blotting检测,为进一步研究GDI1和GDI2的功能奠定了基础.
目的:構建含人GDI1和GDI2基因的真覈錶達載體進行定位和蛋白錶達研究.方法:用PCR從U251細胞cDNA剋隆GDI1和GDI2基因,構建真覈錶達載體pEGFP-N2-GDI1和pEGFP-N2-GDI2,轉染HEK293T細胞.熒光顯微鏡觀察GDI1和GDI2蛋白的細胞內定位,再通過SDS-PAGE和Western blotting鑒定蛋白的錶達.結果:成功剋隆到1 341bp和1 335bp的人源GDI1和GDI2基因,併準確插入真覈錶達載體pEGFP-N2中,熒光觀察這兩箇蛋白定位到細胞漿中,併能利用標籤抗體檢測到GDI1和GDI2的錶達.結論:GDI1和GDI2能夠定位到細胞漿,併能通過Western blotting檢測,為進一步研究GDI1和GDI2的功能奠定瞭基礎.
목적:구건함인GDI1화GDI2기인적진핵표체재체진행정위화단백표체연구.방법:용PCR종U251세포cDNA극륭GDI1화GDI2기인,구건진핵표체재체pEGFP-N2-GDI1화pEGFP-N2-GDI2,전염HEK293T세포.형광현미경관찰GDI1화GDI2단백적세포내정위,재통과SDS-PAGE화Western blotting감정단백적표체.결과:성공극륭도1 341bp화1 335bp적인원GDI1화GDI2기인,병준학삽입진핵표체재체pEGFP-N2중,형광관찰저량개단백정위도세포장중,병능이용표첨항체검측도GDI1화GDI2적표체.결론:GDI1화GDI2능구정위도세포장,병능통과Western blotting검측,위진일보연구GDI1화GDI2적공능전정료기출.
