生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2013年
1期
8-11
,共4页
马宏%贾振华%张岩峰%张星炜%房宝玲%宋水山
馬宏%賈振華%張巖峰%張星煒%房寶玲%宋水山
마굉%가진화%장암봉%장성위%방보령%송수산
根癌农杆菌%attM基因%γ-丁内酯%4-羟基丁酸%聚-4-羟基丁酸酯%重组大肠杆菌
根癌農桿菌%attM基因%γ-丁內酯%4-羥基丁痠%聚-4-羥基丁痠酯%重組大腸桿菌
근암농간균%attM기인%γ-정내지%4-간기정산%취-4-간기정산지%중조대장간균
目的:利用γ-丁内酯在基因工程菌中合成聚-4-羟基丁酸酯.方法:利用PCR技术克隆内酯水解酶attM基因,进行体外表达,并导入质粒pKSSE5.3,构建新的工程菌,进行摇瓶培养.结果:测序结果显示DNA序列全长1 077 bp,包含771bp的开放阅读框,编码256个氨基酸.携带attM基因的表达载体能够进行正常表达,内酯酶活性为5.82U/mL;在摇瓶培养条件下,工程菌E.coli XL1-Blue(pKSSE5.3M9)的培养液中P(4HB)占细胞干重的含量为29％.结论:成功克隆了attM基因,新构建的工程菌能利用γ-丁内酯为碳源合成聚-4-羟基丁酸酯.
目的:利用γ-丁內酯在基因工程菌中閤成聚-4-羥基丁痠酯.方法:利用PCR技術剋隆內酯水解酶attM基因,進行體外錶達,併導入質粒pKSSE5.3,構建新的工程菌,進行搖瓶培養.結果:測序結果顯示DNA序列全長1 077 bp,包含771bp的開放閱讀框,編碼256箇氨基痠.攜帶attM基因的錶達載體能夠進行正常錶達,內酯酶活性為5.82U/mL;在搖瓶培養條件下,工程菌E.coli XL1-Blue(pKSSE5.3M9)的培養液中P(4HB)佔細胞榦重的含量為29％.結論:成功剋隆瞭attM基因,新構建的工程菌能利用γ-丁內酯為碳源閤成聚-4-羥基丁痠酯.
목적:이용γ-정내지재기인공정균중합성취-4-간기정산지.방법:이용PCR기술극륭내지수해매attM기인,진행체외표체,병도입질립pKSSE5.3,구건신적공정균,진행요병배양.결과:측서결과현시DNA서렬전장1 077 bp,포함771bp적개방열독광,편마256개안기산.휴대attM기인적표체재체능구진행정상표체,내지매활성위5.82U/mL;재요병배양조건하,공정균E.coli XL1-Blue(pKSSE5.3M9)적배양액중P(4HB)점세포간중적함량위29％.결론:성공극륭료attM기인,신구건적공정균능이용γ-정내지위탄원합성취-4-간기정산지.
