生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2013年
1期
4-8
,共5页
王洋%王沂%刘青%熊艳杰%毛焕%刘艳敏%张秀军
王洋%王沂%劉青%熊豔傑%毛煥%劉豔敏%張秀軍
왕양%왕기%류청%웅염걸%모환%류염민%장수군
ZNF434%实时定量PCR%组织表达谱%真核表达
ZNF434%實時定量PCR%組織錶達譜%真覈錶達
ZNF434%실시정량PCR%조직표체보%진핵표체
目的:克隆人类ZNF434基因并构建其真核表达质粒,鉴定ZNF434基因的组织表达谱.方法:实时定量PCR检测ZNF434基因在人体10种组织中的表达情况；克隆ZNF434基因的全长开放读码框区并连入真核表达载体pIRES2-EGFP,磷酸钙沉淀法转染HEK293T细胞,荧光显微镜和Western blot鉴定ZNF434蛋白的表达情况.结果:ZNF434基因在检测的人体组织中均有表达,其中骨髓和睾丸表达最高,成功克隆了ZNF434基因并构建了该基因的真核表达质粒ZNF434-pIRES2-EGFP,转染HEK293T细胞可观察到绿色荧光蛋白表达,Western blot可检测出分子量56kDa的Flag-ZNF434融合蛋白表达.结论:明确了人类ZNF434基因的组织表达谱,构建了该基因的真核表达载体,为该基因的进一步研究奠定了基础.
目的:剋隆人類ZNF434基因併構建其真覈錶達質粒,鑒定ZNF434基因的組織錶達譜.方法:實時定量PCR檢測ZNF434基因在人體10種組織中的錶達情況；剋隆ZNF434基因的全長開放讀碼框區併連入真覈錶達載體pIRES2-EGFP,燐痠鈣沉澱法轉染HEK293T細胞,熒光顯微鏡和Western blot鑒定ZNF434蛋白的錶達情況.結果:ZNF434基因在檢測的人體組織中均有錶達,其中骨髓和睪汍錶達最高,成功剋隆瞭ZNF434基因併構建瞭該基因的真覈錶達質粒ZNF434-pIRES2-EGFP,轉染HEK293T細胞可觀察到綠色熒光蛋白錶達,Western blot可檢測齣分子量56kDa的Flag-ZNF434融閤蛋白錶達.結論:明確瞭人類ZNF434基因的組織錶達譜,構建瞭該基因的真覈錶達載體,為該基因的進一步研究奠定瞭基礎.
목적:극륭인류ZNF434기인병구건기진핵표체질립,감정ZNF434기인적조직표체보.방법:실시정량PCR검측ZNF434기인재인체10충조직중적표체정황；극륭ZNF434기인적전장개방독마광구병련입진핵표체재체pIRES2-EGFP,린산개침정법전염HEK293T세포,형광현미경화Western blot감정ZNF434단백적표체정황.결과:ZNF434기인재검측적인체조직중균유표체,기중골수화고환표체최고,성공극륭료ZNF434기인병구건료해기인적진핵표체질립ZNF434-pIRES2-EGFP,전염HEK293T세포가관찰도록색형광단백표체,Western blot가검측출분자량56kDa적Flag-ZNF434융합단백표체.결론:명학료인류ZNF434기인적조직표체보,구건료해기인적진핵표체재체,위해기인적진일보연구전정료기출.
