转化医学杂志
轉化醫學雜誌
전화의학잡지
TRANSLATIONAL MEDICINE JOURNAL
2013年
6期
324-328
,共5页
曹芳英%张宁坤%高连如%朱智明
曹芳英%張寧坤%高連如%硃智明
조방영%장저곤%고련여%주지명
脐带华通胶%间充质干细胞%血管内皮细胞%生长因子%非接触共培养
臍帶華通膠%間充質榦細胞%血管內皮細胞%生長因子%非接觸共培養
제대화통효%간충질간세포%혈관내피세포%생장인자%비접촉공배양
目的 比较诱导因子和非接触共同培养2种方法 诱导人脐带华通胶间充质干细胞(human umbilical cord Wharton's jelly-mesenchymal stem cells,HUW-MSCs)分化为内皮细胞的优劣.方法 剖宫产取脐带用酶消化和组织块贴壁2种方法 获得HUW-MSCs.实验分诱导因子组、共同培养组和单纯培养组.诱导因子组用血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子联合诱导培养;共同培养组HUW-MSCs与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)非接触共同培养;单纯培养组只加培养液培养.培养周期为14 d.第7天检测CD309,第10天进行Dil标记乙酰化低密度脂蛋白(Dil-labeled acetylated low density lipoprotein,Dil-Ac-LDL)吞噬实验;第14天检测CD31、血管假性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和一氧化氮(nitric oxide,NO).结果 各组细胞形态较实验前有显著变化,但均未见典型铺路石样改变.3组细胞表达CD309上调;诱导因子组和单纯培养组表达CD31下降,而共同培养组CD31明显上调.NO及ET-1含量检测均较HUVECs低,但差异无统计学意义(P>0.05),3组之间比较差异同样无统计学意义(P>0.05).vWF及Dil-Ac-LDL各组反应呈弱阳性.结论 HUW-MSCs在诱导因子和内皮细胞旁分泌作用下均具有向内皮细胞分化倾向,使用诱导因子较非接触共同培养方法 诱导HUW-MSCs向内皮分化的效果更好.
目的 比較誘導因子和非接觸共同培養2種方法 誘導人臍帶華通膠間充質榦細胞(human umbilical cord Wharton's jelly-mesenchymal stem cells,HUW-MSCs)分化為內皮細胞的優劣.方法 剖宮產取臍帶用酶消化和組織塊貼壁2種方法 穫得HUW-MSCs.實驗分誘導因子組、共同培養組和單純培養組.誘導因子組用血管內皮細胞生長因子、堿性成纖維細胞生長因子、錶皮生長因子聯閤誘導培養;共同培養組HUW-MSCs與人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)非接觸共同培養;單純培養組隻加培養液培養.培養週期為14 d.第7天檢測CD309,第10天進行Dil標記乙酰化低密度脂蛋白(Dil-labeled acetylated low density lipoprotein,Dil-Ac-LDL)吞噬實驗;第14天檢測CD31、血管假性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、內皮素-1(endothelin-1,ET-1)和一氧化氮(nitric oxide,NO).結果 各組細胞形態較實驗前有顯著變化,但均未見典型鋪路石樣改變.3組細胞錶達CD309上調;誘導因子組和單純培養組錶達CD31下降,而共同培養組CD31明顯上調.NO及ET-1含量檢測均較HUVECs低,但差異無統計學意義(P>0.05),3組之間比較差異同樣無統計學意義(P>0.05).vWF及Dil-Ac-LDL各組反應呈弱暘性.結論 HUW-MSCs在誘導因子和內皮細胞徬分泌作用下均具有嚮內皮細胞分化傾嚮,使用誘導因子較非接觸共同培養方法 誘導HUW-MSCs嚮內皮分化的效果更好.
목적 비교유도인자화비접촉공동배양2충방법 유도인제대화통효간충질간세포(human umbilical cord Wharton's jelly-mesenchymal stem cells,HUW-MSCs)분화위내피세포적우렬.방법 부궁산취제대용매소화화조직괴첩벽2충방법 획득HUW-MSCs.실험분유도인자조、공동배양조화단순배양조.유도인자조용혈관내피세포생장인자、감성성섬유세포생장인자、표피생장인자연합유도배양;공동배양조HUW-MSCs여인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)비접촉공동배양;단순배양조지가배양액배양.배양주기위14 d.제7천검측CD309,제10천진행Dil표기을선화저밀도지단백(Dil-labeled acetylated low density lipoprotein,Dil-Ac-LDL)탄서실험;제14천검측CD31、혈관가성혈우병인자(von Willebrand factor,vWF)、내피소-1(endothelin-1,ET-1)화일양화담(nitric oxide,NO).결과 각조세포형태교실험전유현저변화,단균미견전형포로석양개변.3조세포표체CD309상조;유도인자조화단순배양조표체CD31하강,이공동배양조CD31명현상조.NO급ET-1함량검측균교HUVECs저,단차이무통계학의의(P>0.05),3조지간비교차이동양무통계학의의(P>0.05).vWF급Dil-Ac-LDL각조반응정약양성.결론 HUW-MSCs재유도인자화내피세포방분비작용하균구유향내피세포분화경향,사용유도인자교비접촉공동배양방법 유도HUW-MSCs향내피분화적효과경호.
