医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2012年
5期
338-343
,共6页
韩忠晶%吴明娟%毕武春%张宏宇%肖海凤%魏惠妍%邹朝霞%高旭
韓忠晶%吳明娟%畢武春%張宏宇%肖海鳳%魏惠妍%鄒朝霞%高旭
한충정%오명연%필무춘%장굉우%초해봉%위혜연%추조하%고욱
血红素加氧酶-1%肺癌%细胞失巢凋亡
血紅素加氧酶-1%肺癌%細胞失巢凋亡
혈홍소가양매-1%폐암%세포실소조망
目的 观察血红素加氧酶-1(reme oxygehase-1,HO-1)活性改变对人肺腺癌A549细胞失巢凋亡的影响.方法 将野生型HO-1 (wtHO-1)和失活突变体mHO-1G143H基因与质粒pcDNA3.1(+)连接,构建野生型和突变型HO-1真核表达载体pcDNA3.1(+)-wtHO-1和pcDNA3.1(+)-mHO-1G143H.利用脂质体介导的方法将构建好的重组载体转染人肺腺癌A549细胞构建稳转细胞系,以空载体转染作为对照组.通过G418筛选建立稳定表达野生型和突变型HO-1的人肺腺癌A549细胞系.利用RT-PCR及Western印迹方法检测各稳转细胞系中HO-1 mRNA和蛋白的表达水平.悬浮培养上述稳转细胞系,建立失巢凋亡模型;应用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 与空载体对照组相比,野生型HO-1过表达细胞系中,细胞失巢凋亡率明显下降；突变型HO-1过表达细胞系中,细胞失巢凋亡率增高.结论 HO-1过表达可能抑制肺腺癌A549细胞的失巢凋亡能力,这种作用可能与HO-1催化活性相关.
目的 觀察血紅素加氧酶-1(reme oxygehase-1,HO-1)活性改變對人肺腺癌A549細胞失巢凋亡的影響.方法 將野生型HO-1 (wtHO-1)和失活突變體mHO-1G143H基因與質粒pcDNA3.1(+)連接,構建野生型和突變型HO-1真覈錶達載體pcDNA3.1(+)-wtHO-1和pcDNA3.1(+)-mHO-1G143H.利用脂質體介導的方法將構建好的重組載體轉染人肺腺癌A549細胞構建穩轉細胞繫,以空載體轉染作為對照組.通過G418篩選建立穩定錶達野生型和突變型HO-1的人肺腺癌A549細胞繫.利用RT-PCR及Western印跡方法檢測各穩轉細胞繫中HO-1 mRNA和蛋白的錶達水平.懸浮培養上述穩轉細胞繫,建立失巢凋亡模型;應用流式細胞術檢測細胞凋亡情況.結果 與空載體對照組相比,野生型HO-1過錶達細胞繫中,細胞失巢凋亡率明顯下降；突變型HO-1過錶達細胞繫中,細胞失巢凋亡率增高.結論 HO-1過錶達可能抑製肺腺癌A549細胞的失巢凋亡能力,這種作用可能與HO-1催化活性相關.
목적 관찰혈홍소가양매-1(reme oxygehase-1,HO-1)활성개변대인폐선암A549세포실소조망적영향.방법 장야생형HO-1 (wtHO-1)화실활돌변체mHO-1G143H기인여질립pcDNA3.1(+)련접,구건야생형화돌변형HO-1진핵표체재체pcDNA3.1(+)-wtHO-1화pcDNA3.1(+)-mHO-1G143H.이용지질체개도적방법장구건호적중조재체전염인폐선암A549세포구건은전세포계,이공재체전염작위대조조.통과G418사선건립은정표체야생형화돌변형HO-1적인폐선암A549세포계.이용RT-PCR급Western인적방법검측각은전세포계중HO-1 mRNA화단백적표체수평.현부배양상술은전세포계,건립실소조망모형;응용류식세포술검측세포조망정황.결과 여공재체대조조상비,야생형HO-1과표체세포계중,세포실소조망솔명현하강；돌변형HO-1과표체세포계중,세포실소조망솔증고.결론 HO-1과표체가능억제폐선암A549세포적실소조망능력,저충작용가능여HO-1최화활성상관.
