CAJ | 학술논문

目的鉴定转化生长因子β1(TGF-β1)的优势抗原表位偶联钥孔戚血蓝素(KLH)蛋白人工合成多肽疫苗对SD大鼠的免疫原性,并探讨对SD大鼠实验性肝纤维化的抑制效应.方法人工合成TGF-β1优势抗原表位多肽偶联KLH蛋白后,作为多肽疫苗免疫SD大鼠.40只SPF级SD大鼠随机分为4组,即正常对照组、佐剂对照组、造模组(CCl4诱导)、多肽疫苗组,每组各10只,采用CCl4复合因素诱发大鼠肝纤维化模型.多肽疫苗组动物第1、14、28天连续三次每次腹股沟处及腋窝处多点注射50 μg 0.5ml乳剂(相同体积的弗氏佐剂加合成肽),此后每隔7d免疫一次无任何佐剂的合成肽(50 μg0.5 ml水剂),共免疫10周；造模组及多肽疫苗组自第3周起首次皮下注射40％ CCl4橄榄油溶液2 ml/kg,以后每周2次背部皮下注射40％ CCl4橄榄油溶液1.5 ml/kg、30％乙醇6 ml/kg隔日灌胃并给予高脂饮食连续造模8周.正常对照组大鼠同时给予相同剂量的橄榄油溶液皮下注射；佐剂对照组大鼠同期给予注射用水加弗氏佐剂0.5ml乳剂.第10周处死所有大鼠,ELISA检测血清TGF-β1抗体、肝纤维化指标(HA、Ⅳ-C),全自动生化仪检测血清ALT、AST、TBIL、ALB和GLB,碱水解法检测肝脏羟脯氨酸(Hyp)含量,并进行肝脏病理检查.结果 TGF-β1多肽疫苗可以诱导SD大鼠产生一定量的抗TGF-β1抗体,但是与对照组比较没有统计学差异(P＞0.05).多肽疫苗组生化指标ALT、AST、TBIL与造模组比较有统计学差异(P＜0.05),但是血清HA、Ⅳ-C含量及肝脏Hyp含量与造模组相比并没有统计学差异(P＞0.05).HE、VG染色可见多肽疫苗组较造模组肝组织病理变化及纤维化程度无明显差异.结论 TGF-β1多肽疫苗可以诱导SD大鼠产生一定量的抗TGF-β1中和抗体,且可能具有保肝作用,但其干预治疗实验性大鼠肝纤维化的疗效较差,有待进一步研究.
목적 감정전화생장인자β1(TGF-β1)적우세항원표위우련약공척혈람소(KLH)단백인공합성다태역묘대SD대서적면역원성,병탐토대SD대서실험성간섬유화적억제효응.방법 인공합성TGF-β1우세항원표위다태우련KLH단백후,작위다태역묘면역SD대서.40지SPF급SD대서수궤분위4조,즉정상대조조、좌제대조조、조모조(CCl4유도)、다태역묘조,매조각10지,채용CCl4복합인소유발대서간섬유화모형.다태역묘조동물제1、14、28천련속삼차매차복고구처급액와처다점주사50 μg 0.5ml유제(상동체적적불씨좌제가합성태),차후매격7d면역일차무임하좌제적합성태(50 μg0.5 ml수제),공면역10주；조모조급다태역묘조자제3주기수차피하주사40％ CCl4감람유용액2 ml/kg,이후매주2차배부피하주사40％ CCl4감람유용액1.5 ml/kg、30％을순6 ml/kg격일관위병급여고지음식련속조모8주.정상대조조대서동시급여상동제량적감람유용액피하주사；좌제대조조대서동기급여주사용수가불씨좌제0.5ml유제.제10주처사소유대서,ELISA검측혈청TGF-β1항체、간섬유화지표(HA、Ⅳ-C),전자동생화의검측혈청ALT、AST、TBIL、ALB화GLB,감수해법검측간장간포안산(Hyp)함량,병진행간장병리검사.결과 TGF-β1다태역묘가이유도SD대서산생일정량적항TGF-β1항체,단시여대조조비교몰유통계학차이(P＞0.05).다태역묘조생화지표ALT、AST、TBIL여조모조비교유통계학차이(P＜0.05),단시혈청HA、Ⅳ-C함량급간장Hyp함량여조모조상비병몰유통계학차이(P＞0.05).HE、VG염색가견다태역묘조교조모조간조직병리변화급섬유화정도무명현차이.결론 TGF-β1다태역묘가이유도SD대서산생일정량적항TGF-β1중화항체,차가능구유보간작용,단기간예치료실험성대서간섬유화적료효교차,유대진일보연구.