中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
3期
260-264,270
,共6页
李慧弘%肖长义%袁太宁%许雪梅%黎家华%李红军
李慧弘%肖長義%袁太寧%許雪梅%黎傢華%李紅軍
리혜홍%초장의%원태저%허설매%려가화%리홍군
HeLa细胞%人乳头瘤病毒%宫颈癌%主要外壳蛋白%表达
HeLa細胞%人乳頭瘤病毒%宮頸癌%主要外殼蛋白%錶達
HeLa세포%인유두류병독%궁경암%주요외각단백%표체
目的:通过观察电镜下所见的人宫颈癌细胞株——HeLa细胞胞质内包涵体类物质的性质,了解人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌细胞内HPV主要外壳蛋白(L1)的表达规律.方法:培养HeLa细胞,采用ELISA、光镜和电镜的免疫组织化学、Western blot方法,以HPV18 L1小鼠单克隆抗体对细胞内L1的表达情况进行检测,同时用反转录PCR方法检测细胞内L1 mRNA的存在.结果:ELISA检测显示,HeLa细胞裂解液内有HPV L1的存在.HRP标记的光镜免疫组织化学显示,培养的HeLa细胞呈现强的HPV L1阳性反应.电镜下观察,可见部分培养的HeLa细胞胞质内有团块状包涵体样物质,这些团块由大小均匀的颗粒样物质密集而成.这些颗粒性物质可为HPV L1抗体携带的胶体金颗粒标记.Western blot检测结果显示,HeLa细胞裂解液在56 kD区域,出现了一条L1特异阳性条带,说明HeLa细胞内有HPV18 L1的存在.反向PCR方法检测显示细胞内有L1 mRNA的存在.结论:电镜下所见到的培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞胞质内的包涵体类物质,系由HPV18 L1构成,说明HeLa细胞能够表达L1.
目的:通過觀察電鏡下所見的人宮頸癌細胞株——HeLa細胞胞質內包涵體類物質的性質,瞭解人乳頭瘤病毒(HPV)暘性宮頸癌細胞內HPV主要外殼蛋白(L1)的錶達規律.方法:培養HeLa細胞,採用ELISA、光鏡和電鏡的免疫組織化學、Western blot方法,以HPV18 L1小鼠單剋隆抗體對細胞內L1的錶達情況進行檢測,同時用反轉錄PCR方法檢測細胞內L1 mRNA的存在.結果:ELISA檢測顯示,HeLa細胞裂解液內有HPV L1的存在.HRP標記的光鏡免疫組織化學顯示,培養的HeLa細胞呈現彊的HPV L1暘性反應.電鏡下觀察,可見部分培養的HeLa細胞胞質內有糰塊狀包涵體樣物質,這些糰塊由大小均勻的顆粒樣物質密集而成.這些顆粒性物質可為HPV L1抗體攜帶的膠體金顆粒標記.Western blot檢測結果顯示,HeLa細胞裂解液在56 kD區域,齣現瞭一條L1特異暘性條帶,說明HeLa細胞內有HPV18 L1的存在.反嚮PCR方法檢測顯示細胞內有L1 mRNA的存在.結論:電鏡下所見到的培養的宮頸癌細胞株HeLa細胞胞質內的包涵體類物質,繫由HPV18 L1構成,說明HeLa細胞能夠錶達L1.
목적:통과관찰전경하소견적인궁경암세포주——HeLa세포포질내포함체류물질적성질,료해인유두류병독(HPV)양성궁경암세포내HPV주요외각단백(L1)적표체규률.방법:배양HeLa세포,채용ELISA、광경화전경적면역조직화학、Western blot방법,이HPV18 L1소서단극륭항체대세포내L1적표체정황진행검측,동시용반전록PCR방법검측세포내L1 mRNA적존재.결과:ELISA검측현시,HeLa세포렬해액내유HPV L1적존재.HRP표기적광경면역조직화학현시,배양적HeLa세포정현강적HPV L1양성반응.전경하관찰,가견부분배양적HeLa세포포질내유단괴상포함체양물질,저사단괴유대소균균적과립양물질밀집이성.저사과립성물질가위HPV L1항체휴대적효체금과립표기.Western blot검측결과현시,HeLa세포렬해액재56 kD구역,출현료일조L1특이양성조대,설명HeLa세포내유HPV18 L1적존재.반향PCR방법검측현시세포내유L1 mRNA적존재.결론:전경하소견도적배양적궁경암세포주HeLa세포포질내적포함체류물질,계유HPV18 L1구성,설명HeLa세포능구표체L1.