临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
2013年
11期
1165-1167,1171
,共4页
刘青娟%邢玲玲%郝军%刘淑霞%刘巍%姚芳
劉青娟%邢玲玲%郝軍%劉淑霞%劉巍%姚芳
류청연%형령령%학군%류숙하%류외%요방
细胞因子信号传导抑制蛋白-3%抑瘤素M%肾小管上皮细胞%上皮-间叶细胞转化
細胞因子信號傳導抑製蛋白-3%抑瘤素M%腎小管上皮細胞%上皮-間葉細胞轉化
세포인자신호전도억제단백-3%억류소M%신소관상피세포%상피-간협세포전화
suppressor of cytokine signaling-3%oncostatin M%renal tubular epithelial cell%epithelial-mesenchymal transdifferentiation
目的 观察细胞因子信号传导抑制蛋白-3(suppressors of cytokine signaling,SOCS-3)对抑瘤素M(oncostatin M,OSM)诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响.方法 体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),用Lipofectamine 2000分别转染pCR3.1/SOCS-3表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆,应用OSM(10 ng/ml)进行刺激.培养48 h后收集细胞及上清液,采用Western blot检测SOCS-3、CK18、α-SMA和磷酸化信号传导及转录激活因子3(phospho-Signal transducers andactivators of transcription 3,p-STAT3)的表达;采用酶联免疫吸附实验测定细胞上清液中Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的分泌;采用RT-PCR检测SOCS-3 mRNA的表达.结果 与对照组相比,OSM刺激组肾小管上皮细胞α-SMA和p-STAT3蛋白表达增加,细胞培养上清液Col Ⅰ和FN的分泌增加,而CK18蛋白表达减少.SOCS-3过表达能抑制OSM刺激引起的α-SMA和p-STAT3蛋白表达,减少Col Ⅰ和FN的分泌,同时能够部分恢复OSM刺激引起的CK18蛋白表达.结论 SOCS-3过表达能抑制OSM诱导的肾小管上皮细胞转分化,此过程可能与p-STAT3的磷酸化受抑有关.
目的 觀察細胞因子信號傳導抑製蛋白-3(suppressors of cytokine signaling,SOCS-3)對抑瘤素M(oncostatin M,OSM)誘導的人腎小管上皮細胞轉分化的影響.方法 體外培養人腎近麯小管上皮細胞株(HKC),用Lipofectamine 2000分彆轉染pCR3.1/SOCS-3錶達質粒和pCR3.1空質粒載體,G418篩選暘性剋隆,應用OSM(10 ng/ml)進行刺激.培養48 h後收集細胞及上清液,採用Western blot檢測SOCS-3、CK18、α-SMA和燐痠化信號傳導及轉錄激活因子3(phospho-Signal transducers andactivators of transcription 3,p-STAT3)的錶達;採用酶聯免疫吸附實驗測定細胞上清液中Ⅰ型膠原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)和纖維連接蛋白(fibronectin,FN)的分泌;採用RT-PCR檢測SOCS-3 mRNA的錶達.結果 與對照組相比,OSM刺激組腎小管上皮細胞α-SMA和p-STAT3蛋白錶達增加,細胞培養上清液Col Ⅰ和FN的分泌增加,而CK18蛋白錶達減少.SOCS-3過錶達能抑製OSM刺激引起的α-SMA和p-STAT3蛋白錶達,減少Col Ⅰ和FN的分泌,同時能夠部分恢複OSM刺激引起的CK18蛋白錶達.結論 SOCS-3過錶達能抑製OSM誘導的腎小管上皮細胞轉分化,此過程可能與p-STAT3的燐痠化受抑有關.
목적 관찰세포인자신호전도억제단백-3(suppressors of cytokine signaling,SOCS-3)대억류소M(oncostatin M,OSM)유도적인신소관상피세포전분화적영향.방법 체외배양인신근곡소관상피세포주(HKC),용Lipofectamine 2000분별전염pCR3.1/SOCS-3표체질립화pCR3.1공질립재체,G418사선양성극륭,응용OSM(10 ng/ml)진행자격.배양48 h후수집세포급상청액,채용Western blot검측SOCS-3、CK18、α-SMA화린산화신호전도급전록격활인자3(phospho-Signal transducers andactivators of transcription 3,p-STAT3)적표체;채용매련면역흡부실험측정세포상청액중Ⅰ형효원(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)화섬유련접단백(fibronectin,FN)적분비;채용RT-PCR검측SOCS-3 mRNA적표체.결과 여대조조상비,OSM자격조신소관상피세포α-SMA화p-STAT3단백표체증가,세포배양상청액Col Ⅰ화FN적분비증가,이CK18단백표체감소.SOCS-3과표체능억제OSM자격인기적α-SMA화p-STAT3단백표체,감소Col Ⅰ화FN적분비,동시능구부분회복OSM자격인기적CK18단백표체.결론 SOCS-3과표체능억제OSM유도적신소관상피세포전분화,차과정가능여p-STAT3적린산화수억유관.