水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2013年
1期
1-7
,共7页
鲫%Kaiso%基因克隆%表达时空模式
鯽%Kaiso%基因剋隆%錶達時空模式
즉%Kaiso%기인극륭%표체시공모식
在爪蟾和斑马鱼中,Kaiso 是一种在整个基因组范围内与甲基化CpG 序列特异性结合的转录抑制因子,在调控被甲基化基因表达的时间模式中起重要的作用.为深入研究DNA 甲基化对我国重要养殖鱼类生殖和发育的影响,我们克隆了鲫Kaiso 基因的cDNA 序列,并对其时空表达模式进行了分析.该cDNA 全长3145bp,5'-非翻译区132 bp,3'-非翻译区1117 bp,开放阅读框1896 bp,编码631 个氨基酸.鲫Kaiso 蛋白与其他物种Kaiso 蛋白的同源性分析表明,与其他物种一样,其 N 端和C 端分别有高保守性的BTB/POZ 结构域和锌指结构域.整胚原位杂交结果显示,Kaiso mRNA 在早期胚胎发育的各个时期均广泛表达,信号均一,但从尾芽期开始出现组织特异性表达差异.对不同发育阶段胚胎的实时定量PCR 检测结果表明:卵子中有高丰度的母源Kaiso mRNA 存在; 在卵裂期至囊胚中期胚胎中Kaiso mRNA 的丰度逐渐降低; 从囊胚中期至原肠早期都维持在最低水平状态; 原肠后期其表达水平又逐渐升高,至尾芽期达到与未受精卵中相当的高水平后在器官发生期的整体水平又稍有下降.Kaiso mRNA 丰度在胚胎发育早期的这种变化过程提示在卵裂期检测到的mRNA 可能都是母源mRNA,合子核Kaiso 基因可能是在囊胚晚期后才开始转录.对成体不同组织的实时定量PCR 检测结果表明Kaiso 的表达存在明显的组织特异性差异,在鲫肌肉、视网膜、心脏和脑中表达水平较高,而在肾、胰、肝等器官中表达水平很低.Kaiso 表达的时间和组织特异性提示其作为甲基化基因的转录抑制因子参与了胚胎和成体基因表达时空模式的调控.这些结果为进一步研究Kaiso 和DNA 甲基化修饰在鲫发育调控和遗传育种中的作用提供了基础资料.
在爪蟾和斑馬魚中,Kaiso 是一種在整箇基因組範圍內與甲基化CpG 序列特異性結閤的轉錄抑製因子,在調控被甲基化基因錶達的時間模式中起重要的作用.為深入研究DNA 甲基化對我國重要養殖魚類生殖和髮育的影響,我們剋隆瞭鯽Kaiso 基因的cDNA 序列,併對其時空錶達模式進行瞭分析.該cDNA 全長3145bp,5'-非翻譯區132 bp,3'-非翻譯區1117 bp,開放閱讀框1896 bp,編碼631 箇氨基痠.鯽Kaiso 蛋白與其他物種Kaiso 蛋白的同源性分析錶明,與其他物種一樣,其 N 耑和C 耑分彆有高保守性的BTB/POZ 結構域和鋅指結構域.整胚原位雜交結果顯示,Kaiso mRNA 在早期胚胎髮育的各箇時期均廣汎錶達,信號均一,但從尾芽期開始齣現組織特異性錶達差異.對不同髮育階段胚胎的實時定量PCR 檢測結果錶明:卵子中有高豐度的母源Kaiso mRNA 存在; 在卵裂期至囊胚中期胚胎中Kaiso mRNA 的豐度逐漸降低; 從囊胚中期至原腸早期都維持在最低水平狀態; 原腸後期其錶達水平又逐漸升高,至尾芽期達到與未受精卵中相噹的高水平後在器官髮生期的整體水平又稍有下降.Kaiso mRNA 豐度在胚胎髮育早期的這種變化過程提示在卵裂期檢測到的mRNA 可能都是母源mRNA,閤子覈Kaiso 基因可能是在囊胚晚期後纔開始轉錄.對成體不同組織的實時定量PCR 檢測結果錶明Kaiso 的錶達存在明顯的組織特異性差異,在鯽肌肉、視網膜、心髒和腦中錶達水平較高,而在腎、胰、肝等器官中錶達水平很低.Kaiso 錶達的時間和組織特異性提示其作為甲基化基因的轉錄抑製因子參與瞭胚胎和成體基因錶達時空模式的調控.這些結果為進一步研究Kaiso 和DNA 甲基化脩飾在鯽髮育調控和遺傳育種中的作用提供瞭基礎資料.
재조섬화반마어중,Kaiso 시일충재정개기인조범위내여갑기화CpG 서렬특이성결합적전록억제인자,재조공피갑기화기인표체적시간모식중기중요적작용.위심입연구DNA 갑기화대아국중요양식어류생식화발육적영향,아문극륭료즉Kaiso 기인적cDNA 서렬,병대기시공표체모식진행료분석.해cDNA 전장3145bp,5'-비번역구132 bp,3'-비번역구1117 bp,개방열독광1896 bp,편마631 개안기산.즉Kaiso 단백여기타물충Kaiso 단백적동원성분석표명,여기타물충일양,기 N 단화C 단분별유고보수성적BTB/POZ 결구역화자지결구역.정배원위잡교결과현시,Kaiso mRNA 재조기배태발육적각개시기균엄범표체,신호균일,단종미아기개시출현조직특이성표체차이.대불동발육계단배태적실시정량PCR 검측결과표명:란자중유고봉도적모원Kaiso mRNA 존재; 재란렬기지낭배중기배태중Kaiso mRNA 적봉도축점강저; 종낭배중기지원장조기도유지재최저수평상태; 원장후기기표체수평우축점승고,지미아기체도여미수정란중상당적고수평후재기관발생기적정체수평우초유하강.Kaiso mRNA 봉도재배태발육조기적저충변화과정제시재란렬기검측도적mRNA 가능도시모원mRNA,합자핵Kaiso 기인가능시재낭배만기후재개시전록.대성체불동조직적실시정량PCR 검측결과표명Kaiso 적표체존재명현적조직특이성차이,재즉기육、시망막、심장화뇌중표체수평교고,이재신、이、간등기관중표체수평흔저.Kaiso 표체적시간화조직특이성제시기작위갑기화기인적전록억제인자삼여료배태화성체기인표체시공모식적조공.저사결과위진일보연구Kaiso 화DNA 갑기화수식재즉발육조공화유전육충중적작용제공료기출자료.
