重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2013年
9期
971-973
,共3页
林昭伟%李奇%林荔军%刘云龙%帅明%谢小波
林昭偉%李奇%林荔軍%劉雲龍%帥明%謝小波
림소위%리기%림려군%류운룡%수명%사소파
骨形态发生蛋白2%慢病毒载体%基因
骨形態髮生蛋白2%慢病毒載體%基因
골형태발생단백2%만병독재체%기인
目的 构建重组慢病毒载体质粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP-2/T2A/EGFP并进行鉴定.方法 从Genbank获得BMP2基因序列,结合载体上的酶切位点需要,设计上下游引物,通过PCR方法扩增目的 基因片段,利用Gateway技术 BP反应构建pDown-BMP2-T2A-EGFP,并进行阳性克隆测序,应用LR反应把pDown-BMP2-T2A-EGFP重组入慢病毒目的 载体质粒pLV.Des2d.P/neo,进行阳性克隆测序.结果 获得长度为1 191 bp的BMP2目的 基因片段,质粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP2/T2A/EGFP经双酶切后凝胶电泳鉴定正确,测序结果与Genbank报道序列一致.结论 成功构建重组慢病毒载体质粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP2/T2A/EGFP.
目的 構建重組慢病毒載體質粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP-2/T2A/EGFP併進行鑒定.方法 從Genbank穫得BMP2基因序列,結閤載體上的酶切位點需要,設計上下遊引物,通過PCR方法擴增目的 基因片段,利用Gateway技術 BP反應構建pDown-BMP2-T2A-EGFP,併進行暘性剋隆測序,應用LR反應把pDown-BMP2-T2A-EGFP重組入慢病毒目的 載體質粒pLV.Des2d.P/neo,進行暘性剋隆測序.結果 穫得長度為1 191 bp的BMP2目的 基因片段,質粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP2/T2A/EGFP經雙酶切後凝膠電泳鑒定正確,測序結果與Genbank報道序列一緻.結論 成功構建重組慢病毒載體質粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP2/T2A/EGFP.
목적 구건중조만병독재체질립pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP-2/T2A/EGFP병진행감정.방법 종Genbank획득BMP2기인서렬,결합재체상적매절위점수요,설계상하유인물,통과PCR방법확증목적 기인편단,이용Gateway기술 BP반응구건pDown-BMP2-T2A-EGFP,병진행양성극륭측서,응용LR반응파pDown-BMP2-T2A-EGFP중조입만병독목적 재체질립pLV.Des2d.P/neo,진행양성극륭측서.결과 획득장도위1 191 bp적BMP2목적 기인편단,질립pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP2/T2A/EGFP경쌍매절후응효전영감정정학,측서결과여Genbank보도서렬일치.결론 성공구건중조만병독재체질립pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP2/T2A/EGFP.
