临床和实验医学杂志
臨床和實驗醫學雜誌
림상화실험의학잡지
JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL MEDICINE
2013年
7期
490-492
,共3页
磁珠%牛血清白蛋白%偶联条件%偶联效率
磁珠%牛血清白蛋白%偶聯條件%偶聯效率
자주%우혈청백단백%우련조건%우련효솔
目的 研究不同条件下Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠与牛血清白蛋白(BSA)的偶联效率,探讨其影响因素.方法 分别取Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠与BSA混合,在不同的pH条件、不同的硫酸铵浓度和不同的BSA浓度下37℃振荡孵育18h,然后置于磁力架上静置2~3 min分离上清液.应用Bradford蛋白定量法对偶联前后的上清液进行蛋白定量分析,计算不同条件下的偶联效率.结果 当缓冲液pH值为9.5时偶联效率为1.12μgBSA/mg磁珠,pH值为7.4时偶联效率为0.41 μg BSA/mg磁珠;当反应体系中硫酸铵终浓度为1.2 mol/L时偶联效率为9.5 μg BSA/mg磁珠,硫酸铵浓度为0.8 mol/L时偶联效率为8μg BSA/mg磁珠;当偶联的BSA终浓度为0.4 mol/L时偶联效率为9.5μg BSA/mg磁珠,BSA浓度为0.6 mol/L时偶联效率为13 μg BSA/mg磁珠.结论 缓冲液pH值、硫酸铵浓度和BSA的浓度会影响Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠与BSA的偶联效率,该偶联过程在pH9.5、1.2 mol/L硫酸铵浓度和0.6 mol/L BSA的条件下进行较为适合.
目的 研究不同條件下Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠與牛血清白蛋白(BSA)的偶聯效率,探討其影響因素.方法 分彆取Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠與BSA混閤,在不同的pH條件、不同的硫痠銨濃度和不同的BSA濃度下37℃振盪孵育18h,然後置于磁力架上靜置2~3 min分離上清液.應用Bradford蛋白定量法對偶聯前後的上清液進行蛋白定量分析,計算不同條件下的偶聯效率.結果 噹緩遲液pH值為9.5時偶聯效率為1.12μgBSA/mg磁珠,pH值為7.4時偶聯效率為0.41 μg BSA/mg磁珠;噹反應體繫中硫痠銨終濃度為1.2 mol/L時偶聯效率為9.5 μg BSA/mg磁珠,硫痠銨濃度為0.8 mol/L時偶聯效率為8μg BSA/mg磁珠;噹偶聯的BSA終濃度為0.4 mol/L時偶聯效率為9.5μg BSA/mg磁珠,BSA濃度為0.6 mol/L時偶聯效率為13 μg BSA/mg磁珠.結論 緩遲液pH值、硫痠銨濃度和BSA的濃度會影響Dynabeads M-280 Tosylactivated磁珠與BSA的偶聯效率,該偶聯過程在pH9.5、1.2 mol/L硫痠銨濃度和0.6 mol/L BSA的條件下進行較為適閤.
목적 연구불동조건하Dynabeads M-280 Tosylactivated자주여우혈청백단백(BSA)적우련효솔,탐토기영향인소.방법 분별취Dynabeads M-280 Tosylactivated자주여BSA혼합,재불동적pH조건、불동적류산안농도화불동적BSA농도하37℃진탕부육18h,연후치우자력가상정치2~3 min분리상청액.응용Bradford단백정량법대우련전후적상청액진행단백정량분석,계산불동조건하적우련효솔.결과 당완충액pH치위9.5시우련효솔위1.12μgBSA/mg자주,pH치위7.4시우련효솔위0.41 μg BSA/mg자주;당반응체계중류산안종농도위1.2 mol/L시우련효솔위9.5 μg BSA/mg자주,류산안농도위0.8 mol/L시우련효솔위8μg BSA/mg자주;당우련적BSA종농도위0.4 mol/L시우련효솔위9.5μg BSA/mg자주,BSA농도위0.6 mol/L시우련효솔위13 μg BSA/mg자주.결론 완충액pH치、류산안농도화BSA적농도회영향Dynabeads M-280 Tosylactivated자주여BSA적우련효솔,해우련과정재pH9.5、1.2 mol/L류산안농도화0.6 mol/L BSA적조건하진행교위괄합.