中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2014年
1期
14-18
,共5页
刘亚莉%易佳丽%王莹%井欢%刘春英
劉亞莉%易佳麗%王瑩%井歡%劉春英
류아리%역가려%왕형%정환%류춘영
补中益气汤%磷脂酰肌醇3激酶%磷酸化蛋白激酶
補中益氣湯%燐脂酰肌醇3激酶%燐痠化蛋白激酶
보중익기탕%린지선기순3격매%린산화단백격매
Buzhong Yiqi Decoction%PI3K%AKT
目的 观察补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞A549/DDP的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白和mRNA表达的影响.方法 以SD大鼠制备高、中、低剂量的补中益气汤含药血清和空白对照血清.MTT法筛选最佳含药血清组.培养细胞分为空白血清组、最佳含药血清组、LY294002组(阻滞剂组)、最佳含药血清+LY294002组(联合组)和阴性对照组.免疫细胞化学方法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测PI3K、p-AKT蛋白和mRNA的表达情况.结果 随着含药血清浓度的升高,对顺铂的逆转倍数不断增加;中剂量含药血清作用48 h为最佳含药血清及最佳作用时间;最佳含药血清可使A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT蛋白表达减少,与空白血清组比较差异有统计学意义(P＜0.05);补中益气汤诱导A549/DDP细胞PI3K、p-AKTmRNA表达显著减少,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),与阻滞剂联合作用p-AKTmRNA下降更为明显.结论 补中益气汤可通过降低A549/DDP细胞中PI3K、p-AKTmRNA的表达而影响PI3K/AKT信号转导通路,进而发挥对顺铂耐药的增敏作用.
目的 觀察補中益氣湯含藥血清對肺腺癌順鉑耐藥細胞A549/DDP的抑製作用,併探討其對燐脂酰肌醇3激酶(PI3K)燐痠化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白和mRNA錶達的影響.方法 以SD大鼠製備高、中、低劑量的補中益氣湯含藥血清和空白對照血清.MTT法篩選最佳含藥血清組.培養細胞分為空白血清組、最佳含藥血清組、LY294002組(阻滯劑組)、最佳含藥血清+LY294002組(聯閤組)和陰性對照組.免疫細胞化學方法和實時熒光定量PCR(RT-PCR)方法檢測PI3K、p-AKT蛋白和mRNA的錶達情況.結果 隨著含藥血清濃度的升高,對順鉑的逆轉倍數不斷增加;中劑量含藥血清作用48 h為最佳含藥血清及最佳作用時間;最佳含藥血清可使A549/DDP細胞中PI3K、p-AKT蛋白錶達減少,與空白血清組比較差異有統計學意義(P＜0.05);補中益氣湯誘導A549/DDP細胞PI3K、p-AKTmRNA錶達顯著減少,與空白血清組比較,差異有統計學意義(P＜0.05),與阻滯劑聯閤作用p-AKTmRNA下降更為明顯.結論 補中益氣湯可通過降低A549/DDP細胞中PI3K、p-AKTmRNA的錶達而影響PI3K/AKT信號轉導通路,進而髮揮對順鉑耐藥的增敏作用.
목적 관찰보중익기탕함약혈청대폐선암순박내약세포A549/DDP적억제작용,병탐토기대린지선기순3격매(PI3K)린산화단백격매B(p-AKT)단백화mRNA표체적영향.방법 이SD대서제비고、중、저제량적보중익기탕함약혈청화공백대조혈청.MTT법사선최가함약혈청조.배양세포분위공백혈청조、최가함약혈청조、LY294002조(조체제조)、최가함약혈청+LY294002조(연합조)화음성대조조.면역세포화학방법화실시형광정량PCR(RT-PCR)방법검측PI3K、p-AKT단백화mRNA적표체정황.결과 수착함약혈청농도적승고,대순박적역전배수불단증가;중제량함약혈청작용48 h위최가함약혈청급최가작용시간;최가함약혈청가사A549/DDP세포중PI3K、p-AKT단백표체감소,여공백혈청조비교차이유통계학의의(P＜0.05);보중익기탕유도A549/DDP세포PI3K、p-AKTmRNA표체현저감소,여공백혈청조비교,차이유통계학의의(P＜0.05),여조체제연합작용p-AKTmRNA하강경위명현.결론 보중익기탕가통과강저A549/DDP세포중PI3K、p-AKTmRNA적표체이영향PI3K/AKT신호전도통로,진이발휘대순박내약적증민작용.
