临床肝胆病杂志
臨床肝膽病雜誌
림상간담병잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
2014年
2期
158-161
,共4页
李光明%颜士岩%王军%潘勤%范建高
李光明%顏士巖%王軍%潘勤%範建高
리광명%안사암%왕군%반근%범건고
整合素连接激酶%结缔组织生长因子%星型细胞%RNA,小分子干扰
整閤素連接激酶%結締組織生長因子%星型細胞%RNA,小分子榦擾
정합소련접격매%결체조직생장인자%성형세포%RNA,소분자간우
integrin-linked kinase%connective tissue growth factor%astrocytes%RNA,small interfering
目的 研究整合素连接激酶(ILK)在重组结缔组织生长因子(rCTGF)诱导大鼠原代肝星状细胞(HSC)表型转化中的作用.方法 应用胶原酶原位灌注+密度梯度离心法分离SD大鼠原代HSC,细胞贴壁培养24h后以rCTGF处理,24h后转染ILK小干扰RNA(siRNA)或对照siRNA,设rCTGF对照及空白对照.应用RT-PCR及Western Blot检测转染siRNA 24、48及72 h时HSC α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、ILK及Ⅰ型胶原基因表达水平变化.计量资料采用t检验.结果 与空白对照相比,rCTGF处理可显著上调大鼠HSC αSMA、ILK蛋白及Ⅰ型胶原mRNA表达.转染ILK siRNA可特异性抑制以TGF诱导的ILK表达上调,与rCT-GF对照相比,转染ILK siRNA 24、48及72 h时,HSC ILK蛋白表达分别下调72％ ±6％ (t=21.39,P＜0.01)、87％±9％(t=68.25,P＜0.01)及47％±3％(t=18.25,P=0.003);αSMA蛋白及Ⅰ型胶原mRNA表达分别下调5％±1％(t=2.52,P＞0.05)及6％±3％(t=1.63,P＞0.05)、31％±7％(t=34.77,P＜0.01)及20±5％ (t=6.71,P＜0.05)和67％ ±8％(t=58.82,P＜0.01)及43％±6％(t=15.21,P＜0.01);转染对照siRNA时,HSC ILK、αSMA及Ⅰ型胶原mRNA表达在相同时点无显著变化.结论 ILK可能部分介导了以TGF诱导的大鼠HSC表型转化.
目的 研究整閤素連接激酶(ILK)在重組結締組織生長因子(rCTGF)誘導大鼠原代肝星狀細胞(HSC)錶型轉化中的作用.方法 應用膠原酶原位灌註+密度梯度離心法分離SD大鼠原代HSC,細胞貼壁培養24h後以rCTGF處理,24h後轉染ILK小榦擾RNA(siRNA)或對照siRNA,設rCTGF對照及空白對照.應用RT-PCR及Western Blot檢測轉染siRNA 24、48及72 h時HSC α平滑肌肌動蛋白(αSMA)、ILK及Ⅰ型膠原基因錶達水平變化.計量資料採用t檢驗.結果 與空白對照相比,rCTGF處理可顯著上調大鼠HSC αSMA、ILK蛋白及Ⅰ型膠原mRNA錶達.轉染ILK siRNA可特異性抑製以TGF誘導的ILK錶達上調,與rCT-GF對照相比,轉染ILK siRNA 24、48及72 h時,HSC ILK蛋白錶達分彆下調72％ ±6％ (t=21.39,P＜0.01)、87％±9％(t=68.25,P＜0.01)及47％±3％(t=18.25,P=0.003);αSMA蛋白及Ⅰ型膠原mRNA錶達分彆下調5％±1％(t=2.52,P＞0.05)及6％±3％(t=1.63,P＞0.05)、31％±7％(t=34.77,P＜0.01)及20±5％ (t=6.71,P＜0.05)和67％ ±8％(t=58.82,P＜0.01)及43％±6％(t=15.21,P＜0.01);轉染對照siRNA時,HSC ILK、αSMA及Ⅰ型膠原mRNA錶達在相同時點無顯著變化.結論 ILK可能部分介導瞭以TGF誘導的大鼠HSC錶型轉化.
목적 연구정합소련접격매(ILK)재중조결체조직생장인자(rCTGF)유도대서원대간성상세포(HSC)표형전화중적작용.방법 응용효원매원위관주+밀도제도리심법분리SD대서원대HSC,세포첩벽배양24h후이rCTGF처리,24h후전염ILK소간우RNA(siRNA)혹대조siRNA,설rCTGF대조급공백대조.응용RT-PCR급Western Blot검측전염siRNA 24、48급72 h시HSC α평활기기동단백(αSMA)、ILK급Ⅰ형효원기인표체수평변화.계량자료채용t검험.결과 여공백대조상비,rCTGF처리가현저상조대서HSC αSMA、ILK단백급Ⅰ형효원mRNA표체.전염ILK siRNA가특이성억제이TGF유도적ILK표체상조,여rCT-GF대조상비,전염ILK siRNA 24、48급72 h시,HSC ILK단백표체분별하조72％ ±6％ (t=21.39,P＜0.01)、87％±9％(t=68.25,P＜0.01)급47％±3％(t=18.25,P=0.003);αSMA단백급Ⅰ형효원mRNA표체분별하조5％±1％(t=2.52,P＞0.05)급6％±3％(t=1.63,P＞0.05)、31％±7％(t=34.77,P＜0.01)급20±5％ (t=6.71,P＜0.05)화67％ ±8％(t=58.82,P＜0.01)급43％±6％(t=15.21,P＜0.01);전염대조siRNA시,HSC ILK、αSMA급Ⅰ형효원mRNA표체재상동시점무현저변화.결론 ILK가능부분개도료이TGF유도적대서HSC표형전화.
