基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
12期
1564-1571
,共8页
谢佳瑛%胥文春%张晓艳%谌海兰%唐敏
謝佳瑛%胥文春%張曉豔%諶海蘭%唐敏
사가영%서문춘%장효염%심해란%당민
Notch信号通路%骨形态发生蛋白9%MAPK途径%成骨分化
Notch信號通路%骨形態髮生蛋白9%MAPK途徑%成骨分化
Notch신호통로%골형태발생단백9%MAPK도경%성골분화
Notch signaling pathway%bone morphogentic protein 9%MAPK signaling%ostegenic differentiation
目的 探讨Notch信号是否通过MAPK通路影响BMP9诱导C2C12细胞成骨分化.方法 利用BMP9腺病毒处理C2C12细胞5d后,用PCR和Western blot检测MAPK通路中P38、Erk1/2和JNK总蛋白以及磷酸化水平.用Notch信号特异性抑制剂DAPT阻断Notch信号后,细胞化学染色分析ALP和钙盐沉积,以及早晚期成骨指标Runx2和OCN在RNA以及蛋白水平上的变化.同时检测BMPs靶基因Id1 、Id2和Id3 RNA水平的表达和MAPK信号中P38、Erk1/2和JNK总蛋白以及磷酸化水平变化.结果BMP9能上调Hey1和Notch信号的配、受体表达;BMP9不影响P38、Erk1/2和JNK总蛋白的表达,但能上调其磷酸化水平;DAPT能抑制BMP9诱导C2C12细胞的ALP活性以及钙盐沉积;影响Runx2和OCN成骨标志物的表达;阻断Notch信号后Id1、Id2和Id3表达受到抑制,P38、Erk1/2磷酸化水平下调,而JNK磷酸化水平无明显变化.结论 Notch信号通过MAPK途径参与了BMP9诱导的C2C12细胞的成骨分化.
目的 探討Notch信號是否通過MAPK通路影響BMP9誘導C2C12細胞成骨分化.方法 利用BMP9腺病毒處理C2C12細胞5d後,用PCR和Western blot檢測MAPK通路中P38、Erk1/2和JNK總蛋白以及燐痠化水平.用Notch信號特異性抑製劑DAPT阻斷Notch信號後,細胞化學染色分析ALP和鈣鹽沉積,以及早晚期成骨指標Runx2和OCN在RNA以及蛋白水平上的變化.同時檢測BMPs靶基因Id1 、Id2和Id3 RNA水平的錶達和MAPK信號中P38、Erk1/2和JNK總蛋白以及燐痠化水平變化.結果BMP9能上調Hey1和Notch信號的配、受體錶達;BMP9不影響P38、Erk1/2和JNK總蛋白的錶達,但能上調其燐痠化水平;DAPT能抑製BMP9誘導C2C12細胞的ALP活性以及鈣鹽沉積;影響Runx2和OCN成骨標誌物的錶達;阻斷Notch信號後Id1、Id2和Id3錶達受到抑製,P38、Erk1/2燐痠化水平下調,而JNK燐痠化水平無明顯變化.結論 Notch信號通過MAPK途徑參與瞭BMP9誘導的C2C12細胞的成骨分化.
목적 탐토Notch신호시부통과MAPK통로영향BMP9유도C2C12세포성골분화.방법 이용BMP9선병독처리C2C12세포5d후,용PCR화Western blot검측MAPK통로중P38、Erk1/2화JNK총단백이급린산화수평.용Notch신호특이성억제제DAPT조단Notch신호후,세포화학염색분석ALP화개염침적,이급조만기성골지표Runx2화OCN재RNA이급단백수평상적변화.동시검측BMPs파기인Id1 、Id2화Id3 RNA수평적표체화MAPK신호중P38、Erk1/2화JNK총단백이급린산화수평변화.결과BMP9능상조Hey1화Notch신호적배、수체표체;BMP9불영향P38、Erk1/2화JNK총단백적표체,단능상조기린산화수평;DAPT능억제BMP9유도C2C12세포적ALP활성이급개염침적;영향Runx2화OCN성골표지물적표체;조단Notch신호후Id1、Id2화Id3표체수도억제,P38、Erk1/2린산화수평하조,이JNK린산화수평무명현변화.결론 Notch신호통과MAPK도경삼여료BMP9유도적C2C12세포적성골분화.
