中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
11期
2001-2005
,共5页
朱琳%刘青娟%徐宁%要红叶%邢玲玲%李凡%刘淑霞%郝军
硃琳%劉青娟%徐寧%要紅葉%邢玲玲%李凡%劉淑霞%郝軍
주림%류청연%서저%요홍협%형령령%리범%류숙하%학군
糖尿病肾病%高糖%HKC细胞%FOXO1蛋白%脂质沉积
糖尿病腎病%高糖%HKC細胞%FOXO1蛋白%脂質沉積
당뇨병신병%고당%HKC세포%FOXO1단백%지질침적
目的:研究叉头框蛋白O1(FOXO1)表达和磷酸化过程对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂质沉积的影响.方法:体外培养人肾小管上皮细胞株HKC,给予高糖刺激后免疫荧光及Western blotting检测总FOXO1、磷酸化FOXO1和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)的表达,油红O染色测定细胞内脂质沉积;构建野生型和磷酸化位点突变型FOXO1质粒,转染入HKC细胞后给予高糖刺激,采用免疫荧光、Western blotting和油红O染色确定FOXO1磷酸化位点突变对肾小管上皮细胞脂质代谢的影响.结果:高糖刺激HKC细胞48 h后,总FOXO1在正常糖组和高糖组的表达未见差异,而磷酸化FOXO1及SREBP-1表达明显上调,细胞内脂滴显著增加.将构建的野生型FOXO1质粒转染人细胞后,上调了总FOXO1和磷酸化FOXO1的表达,增加了SREBP-1表达和细胞内脂滴含量;而磷酸化位点突变的FOXO1质粒避免了高糖诱导引起的SREBP-1上调和细胞内脂质沉积.结论:磷酸化FOXO1参与了高糖诱导的肾小管上皮细胞SREBP-1上调和细胞内脂质聚集;磷酸化位点的突变可避免高糖引起的肾小管上皮细胞SREBP-1上调和脂质沉积.
目的:研究扠頭框蛋白O1(FOXO1)錶達和燐痠化過程對高糖刺激下人腎小管上皮細胞脂質沉積的影響.方法:體外培養人腎小管上皮細胞株HKC,給予高糖刺激後免疫熒光及Western blotting檢測總FOXO1、燐痠化FOXO1和固醇調節元件結閤蛋白1(SREBP1)的錶達,油紅O染色測定細胞內脂質沉積;構建野生型和燐痠化位點突變型FOXO1質粒,轉染入HKC細胞後給予高糖刺激,採用免疫熒光、Western blotting和油紅O染色確定FOXO1燐痠化位點突變對腎小管上皮細胞脂質代謝的影響.結果:高糖刺激HKC細胞48 h後,總FOXO1在正常糖組和高糖組的錶達未見差異,而燐痠化FOXO1及SREBP-1錶達明顯上調,細胞內脂滴顯著增加.將構建的野生型FOXO1質粒轉染人細胞後,上調瞭總FOXO1和燐痠化FOXO1的錶達,增加瞭SREBP-1錶達和細胞內脂滴含量;而燐痠化位點突變的FOXO1質粒避免瞭高糖誘導引起的SREBP-1上調和細胞內脂質沉積.結論:燐痠化FOXO1參與瞭高糖誘導的腎小管上皮細胞SREBP-1上調和細胞內脂質聚集;燐痠化位點的突變可避免高糖引起的腎小管上皮細胞SREBP-1上調和脂質沉積.
목적:연구차두광단백O1(FOXO1)표체화린산화과정대고당자격하인신소관상피세포지질침적적영향.방법:체외배양인신소관상피세포주HKC,급여고당자격후면역형광급Western blotting검측총FOXO1、린산화FOXO1화고순조절원건결합단백1(SREBP1)적표체,유홍O염색측정세포내지질침적;구건야생형화린산화위점돌변형FOXO1질립,전염입HKC세포후급여고당자격,채용면역형광、Western blotting화유홍O염색학정FOXO1린산화위점돌변대신소관상피세포지질대사적영향.결과:고당자격HKC세포48 h후,총FOXO1재정상당조화고당조적표체미견차이,이린산화FOXO1급SREBP-1표체명현상조,세포내지적현저증가.장구건적야생형FOXO1질립전염인세포후,상조료총FOXO1화린산화FOXO1적표체,증가료SREBP-1표체화세포내지적함량;이린산화위점돌변적FOXO1질립피면료고당유도인기적SREBP-1상조화세포내지질침적.결론:린산화FOXO1삼여료고당유도적신소관상피세포SREBP-1상조화세포내지질취집;린산화위점적돌변가피면고당인기적신소관상피세포SREBP-1상조화지질침적.
