中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
11期
1921-1927
,共7页
白慧丽%李宝林%何方%张汝益%严树涓%刘晨%杨丹丹%施琼
白慧麗%李寶林%何方%張汝益%嚴樹涓%劉晨%楊丹丹%施瓊
백혜려%리보림%하방%장여익%엄수연%류신%양단단%시경
骨髓基质细胞%SMMC-7721细胞%趋化因子CCL5%微环境
骨髓基質細胞%SMMC-7721細胞%趨化因子CCL5%微環境
골수기질세포%SMMC-7721세포%추화인자CCL5%미배경
目的:探讨肿瘤微环境中人骨髓基质细胞HS-5对人肝癌细胞SMMC-7721的作用及机制.方法:采用HS-5细胞条件培养基 (HS-5 cell-conditioned medium,HS-5-CM)处理肝癌细胞SMMC-7721,分别通过MTT、划痕和Transwell实验分析对SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭的影响;采用Transwell小室间接共培养SMMC-7721细胞与HS-5细胞,应用实时荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)、ELISA或Western blotting分别测定SMMC-7721细胞中趋化因子CCL5及其受体CCR5 的mRNA和蛋白表达;此外加入PI3K抑制剂LY294002后,通过Western blotting检测SMMC-7721细胞中PI3K-Akt通路的相关蛋白Akt及其磷酸化水平的变化,以及qRT-PCR和ELISA检测SMMC-7721细胞中CCL5的变化.结果:HS-5-CM可以促进SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭;间接共培养后,SMMC-7721细胞中CCL5及CCR5 mRNA和蛋白表达均有增高;PI3K抑制剂LY294002可有效抑制共培养后SMMC-7721细胞中PI3K-Akt通路的激活,并减少其CCL5的分泌.结论:HS-5细胞可以促进SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭能力;与HS-5细胞间接共培养,激活了肝癌细胞SMMC-7721的PI3K-Akt通路,从而增加SMMC-7721细胞的CCL5分泌.
目的:探討腫瘤微環境中人骨髓基質細胞HS-5對人肝癌細胞SMMC-7721的作用及機製.方法:採用HS-5細胞條件培養基 (HS-5 cell-conditioned medium,HS-5-CM)處理肝癌細胞SMMC-7721,分彆通過MTT、劃痕和Transwell實驗分析對SMMC-7721細胞增殖、遷移和侵襲的影響;採用Transwell小室間接共培養SMMC-7721細胞與HS-5細胞,應用實時熒光定量RT-PCR (qRT-PCR)、ELISA或Western blotting分彆測定SMMC-7721細胞中趨化因子CCL5及其受體CCR5 的mRNA和蛋白錶達;此外加入PI3K抑製劑LY294002後,通過Western blotting檢測SMMC-7721細胞中PI3K-Akt通路的相關蛋白Akt及其燐痠化水平的變化,以及qRT-PCR和ELISA檢測SMMC-7721細胞中CCL5的變化.結果:HS-5-CM可以促進SMMC-7721細胞增殖、遷移和侵襲;間接共培養後,SMMC-7721細胞中CCL5及CCR5 mRNA和蛋白錶達均有增高;PI3K抑製劑LY294002可有效抑製共培養後SMMC-7721細胞中PI3K-Akt通路的激活,併減少其CCL5的分泌.結論:HS-5細胞可以促進SMMC-7721細胞的增殖、遷移和侵襲能力;與HS-5細胞間接共培養,激活瞭肝癌細胞SMMC-7721的PI3K-Akt通路,從而增加SMMC-7721細胞的CCL5分泌.
목적:탐토종류미배경중인골수기질세포HS-5대인간암세포SMMC-7721적작용급궤제.방법:채용HS-5세포조건배양기 (HS-5 cell-conditioned medium,HS-5-CM)처리간암세포SMMC-7721,분별통과MTT、화흔화Transwell실험분석대SMMC-7721세포증식、천이화침습적영향;채용Transwell소실간접공배양SMMC-7721세포여HS-5세포,응용실시형광정량RT-PCR (qRT-PCR)、ELISA혹Western blotting분별측정SMMC-7721세포중추화인자CCL5급기수체CCR5 적mRNA화단백표체;차외가입PI3K억제제LY294002후,통과Western blotting검측SMMC-7721세포중PI3K-Akt통로적상관단백Akt급기린산화수평적변화,이급qRT-PCR화ELISA검측SMMC-7721세포중CCL5적변화.결과:HS-5-CM가이촉진SMMC-7721세포증식、천이화침습;간접공배양후,SMMC-7721세포중CCL5급CCR5 mRNA화단백표체균유증고;PI3K억제제LY294002가유효억제공배양후SMMC-7721세포중PI3K-Akt통로적격활,병감소기CCL5적분비.결론:HS-5세포가이촉진SMMC-7721세포적증식、천이화침습능력;여HS-5세포간접공배양,격활료간암세포SMMC-7721적PI3K-Akt통로,종이증가SMMC-7721세포적CCL5분비.