中国全科医学
中國全科醫學
중국전과의학
CHINESE GENERAL PRACTICE
2013年
32期
3774-3777
,共4页
李静宜%孙岚%秦选光%董艳青%姜越%李丹%田秀君%辛德莉
李靜宜%孫嵐%秦選光%董豔青%薑越%李丹%田秀君%辛德莉
리정의%손람%진선광%동염청%강월%리단%전수군%신덕리
支原体,肺炎%大环内酯类%抗药性,微生物%聚合酶链反应%点突变
支原體,肺炎%大環內酯類%抗藥性,微生物%聚閤酶鏈反應%點突變
지원체,폐염%대배내지류%항약성,미생물%취합매련반응%점돌변
背景肺炎支原体(MP)是儿童社区获得性肺炎的主要病原体,对目前常用治疗药物--大环内酯类抗生素的耐药率有升高趋势,而传统检测MP耐药株的方法耗时耗力.目的 建立一种快速诊断MP感染及耐药表型的新方法.方法 采用实时荧光定量PCR技术,以23S rRNA为靶序列,设计不同基因型探针及引物,构建阳性质粒,建立标准曲线.结果 实时荧光定量PCR检测敏感2063A质粒和耐药2063G质粒的下限分别为6和60拷贝数,特异性实验结果显示,仅生殖支原体出现扩增.与23S rRNA巢式PCR测序结果相比,实时荧光定量PCR鉴定43株MP临床分离株2063位点等位基因的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均为100%.12份鼻咽拭子标本实时荧光定量PCR MP阳性检出率为10/12,耐药率为4/12,1份标本同时发现2063A和2063G位点.结论 本研究初步建立了一种快速诊断MP感染并判断其耐药基因型的实时荧光定量PCR方法,具有较高的灵敏度.
揹景肺炎支原體(MP)是兒童社區穫得性肺炎的主要病原體,對目前常用治療藥物--大環內酯類抗生素的耐藥率有升高趨勢,而傳統檢測MP耐藥株的方法耗時耗力.目的 建立一種快速診斷MP感染及耐藥錶型的新方法.方法 採用實時熒光定量PCR技術,以23S rRNA為靶序列,設計不同基因型探針及引物,構建暘性質粒,建立標準麯線.結果 實時熒光定量PCR檢測敏感2063A質粒和耐藥2063G質粒的下限分彆為6和60拷貝數,特異性實驗結果顯示,僅生殖支原體齣現擴增.與23S rRNA巢式PCR測序結果相比,實時熒光定量PCR鑒定43株MP臨床分離株2063位點等位基因的靈敏度、特異度、暘性預測值、陰性預測值均為100%.12份鼻嚥拭子標本實時熒光定量PCR MP暘性檢齣率為10/12,耐藥率為4/12,1份標本同時髮現2063A和2063G位點.結論 本研究初步建立瞭一種快速診斷MP感染併判斷其耐藥基因型的實時熒光定量PCR方法,具有較高的靈敏度.
배경폐염지원체(MP)시인동사구획득성폐염적주요병원체,대목전상용치료약물--대배내지류항생소적내약솔유승고추세,이전통검측MP내약주적방법모시모력.목적 건립일충쾌속진단MP감염급내약표형적신방법.방법 채용실시형광정량PCR기술,이23S rRNA위파서렬,설계불동기인형탐침급인물,구건양성질립,건립표준곡선.결과 실시형광정량PCR검측민감2063A질립화내약2063G질립적하한분별위6화60고패수,특이성실험결과현시,부생식지원체출현확증.여23S rRNA소식PCR측서결과상비,실시형광정량PCR감정43주MP림상분리주2063위점등위기인적령민도、특이도、양성예측치、음성예측치균위100%.12빈비인식자표본실시형광정량PCR MP양성검출솔위10/12,내약솔위4/12,1빈표본동시발현2063A화2063G위점.결론 본연구초보건립료일충쾌속진단MP감염병판단기내약기인형적실시형광정량PCR방법,구유교고적령민도.
