中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2014年
6期
14-17
,共4页
周五朵%朱二鹏%蔡一龙%温亚萍%吴异健%吴宝成%王全溪
週五朵%硃二鵬%蔡一龍%溫亞萍%吳異健%吳寶成%王全溪
주오타%주이붕%채일룡%온아평%오이건%오보성%왕전계
番鸭呼肠孤病毒%双重PCR%鉴别
番鴨呼腸孤病毒%雙重PCR%鑒彆
번압호장고병독%쌍중PCR%감별
自2001年我国出现番鸭感染呼肠孤病毒(MDRV)报道以来,本课题组从病鸭体内分离到2株在临床上致病力差别很大的病毒毒株,并分别命名为YJL株和YB株.本研究根据这2株病毒基因特点,分别针对YB株P10蛋白基因和YJL株P17蛋白基因设计2对特异性引物,通过条件优化建立了鉴别2个毒株的双重PCR.结果显示:该方法可同时扩增出YB 288 bp、YJL 441 bp长度的特异性片段,而对其他番鸭病病原无扩增结果;该方法最佳反应条件为95℃5 min,94℃1 min,55℃45 s,72℃1 min,30个循环,72℃延伸10 min;该方法最低能检出10 pg YB和YJL株RNA模板;使用单重PCR和多重PCR方法对60份临床病料检测验证,两者符合率为100％.结果表明该方法特异性、敏感性和重复性良好,具有快速、准确的特点,可用于这2种不同毒力毒株的鉴别.
自2001年我國齣現番鴨感染呼腸孤病毒(MDRV)報道以來,本課題組從病鴨體內分離到2株在臨床上緻病力差彆很大的病毒毒株,併分彆命名為YJL株和YB株.本研究根據這2株病毒基因特點,分彆針對YB株P10蛋白基因和YJL株P17蛋白基因設計2對特異性引物,通過條件優化建立瞭鑒彆2箇毒株的雙重PCR.結果顯示:該方法可同時擴增齣YB 288 bp、YJL 441 bp長度的特異性片段,而對其他番鴨病病原無擴增結果;該方法最佳反應條件為95℃5 min,94℃1 min,55℃45 s,72℃1 min,30箇循環,72℃延伸10 min;該方法最低能檢齣10 pg YB和YJL株RNA模闆;使用單重PCR和多重PCR方法對60份臨床病料檢測驗證,兩者符閤率為100％.結果錶明該方法特異性、敏感性和重複性良好,具有快速、準確的特點,可用于這2種不同毒力毒株的鑒彆.
자2001년아국출현번압감염호장고병독(MDRV)보도이래,본과제조종병압체내분리도2주재림상상치병력차별흔대적병독독주,병분별명명위YJL주화YB주.본연구근거저2주병독기인특점,분별침대YB주P10단백기인화YJL주P17단백기인설계2대특이성인물,통과조건우화건립료감별2개독주적쌍중PCR.결과현시:해방법가동시확증출YB 288 bp、YJL 441 bp장도적특이성편단,이대기타번압병병원무확증결과;해방법최가반응조건위95℃5 min,94℃1 min,55℃45 s,72℃1 min,30개순배,72℃연신10 min;해방법최저능검출10 pg YB화YJL주RNA모판;사용단중PCR화다중PCR방법대60빈림상병료검측험증,량자부합솔위100％.결과표명해방법특이성、민감성화중복성량호,구유쾌속、준학적특점,가용우저2충불동독력독주적감별.
