石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2013年
4期
443-448
,共6页
马世俊%马军德%贾斌%申红%王绪海%张挺军%郭玉强%蔡国宝
馬世俊%馬軍德%賈斌%申紅%王緒海%張挺軍%郭玉彊%蔡國寶
마세준%마군덕%가빈%신홍%왕서해%장정군%곽옥강%채국보
zfx%RNAi%shRNA%小鼠生精细胞
zfx%RNAi%shRNA%小鼠生精細胞
zfx%RNAi%shRNA%소서생정세포
zfx%RNAi%shRNA%spermatogenic cells of mice
zfx是小鼠X性染色体上的特异基因,可能与X精子的发生有关,沉默或下调该基因的正常表达可影响X精子的正常发育,使后代性别比列发生偏移.本实验为了筛选对小鼠zfx基因有效的shRNA分子,利用RNAi技术针对X精子zfx基因组mRNA的不同外显子选取10个干扰靶位,成功构建了10个shRNA质粒表达载体;通过对体外培养的生精细胞zfx基因的干扰试验,并用qRT-PCR方法检测生精细胞中zfx mRNA的表达丰度.结果显示:有4个干扰质粒组对zfx基因表达抑制明显,抑制率为33.47％～92.61％,其中pqz1、pqz3和pqz4等3个表达质粒抑制效果最好,抑制率分别为70.1％ (P＜0.05)、85％ (P＜0.05)和92.61％ (P＜0.01),表明这3个质粒能明显抑制小鼠生精细胞中zfx基因的表达.
zfx是小鼠X性染色體上的特異基因,可能與X精子的髮生有關,沉默或下調該基因的正常錶達可影響X精子的正常髮育,使後代性彆比列髮生偏移.本實驗為瞭篩選對小鼠zfx基因有效的shRNA分子,利用RNAi技術針對X精子zfx基因組mRNA的不同外顯子選取10箇榦擾靶位,成功構建瞭10箇shRNA質粒錶達載體;通過對體外培養的生精細胞zfx基因的榦擾試驗,併用qRT-PCR方法檢測生精細胞中zfx mRNA的錶達豐度.結果顯示:有4箇榦擾質粒組對zfx基因錶達抑製明顯,抑製率為33.47％～92.61％,其中pqz1、pqz3和pqz4等3箇錶達質粒抑製效果最好,抑製率分彆為70.1％ (P＜0.05)、85％ (P＜0.05)和92.61％ (P＜0.01),錶明這3箇質粒能明顯抑製小鼠生精細胞中zfx基因的錶達.
zfx시소서X성염색체상적특이기인,가능여X정자적발생유관,침묵혹하조해기인적정상표체가영향X정자적정상발육,사후대성별비렬발생편이.본실험위료사선대소서zfx기인유효적shRNA분자,이용RNAi기술침대X정자zfx기인조mRNA적불동외현자선취10개간우파위,성공구건료10개shRNA질립표체재체;통과대체외배양적생정세포zfx기인적간우시험,병용qRT-PCR방법검측생정세포중zfx mRNA적표체봉도.결과현시:유4개간우질립조대zfx기인표체억제명현,억제솔위33.47％～92.61％,기중pqz1、pqz3화pqz4등3개표체질립억제효과최호,억제솔분별위70.1％ (P＜0.05)、85％ (P＜0.05)화92.61％ (P＜0.01),표명저3개질립능명현억제소서생정세포중zfx기인적표체.
