水产科学
水產科學
수산과학
FISHERIES SCIENCE
2013年
5期
273-279
,共7页
陈建华%张俊彬%王怀民%张晓君%阎斌伦
陳建華%張俊彬%王懷民%張曉君%閻斌倫
진건화%장준빈%왕부민%장효군%염빈륜
泥鳅%HSC70%温和气单胞菌%基因表达
泥鰍%HSC70%溫和氣單胞菌%基因錶達
니추%HSC70%온화기단포균%기인표체
采用RT-PCR和RACE技术由泥鳅中克隆获得HSC70 cDNA的全长序列.结果表明,该cDNA全长2338 bp,包括5'非翻译区(5'-UTR) 92 bp,3'非翻译区(3'-UTR)293 bp,开放阅读框1953bp,编码650个氨基酸.预测的蛋白质分子量为71.24 ku,等电点为5.31.该蛋白含有Dnak特征基序和2个HSP70家族标签序列,胞质HSP70特征序列及四肽简单重复序列.该序列与草鱼的相似性最高(97.5%),与人、非洲爪蟾、鸡等的相似性为87.2%~95.4%.半定量RT-PCR显示,HSC70mRNA在正常泥鳅大脑、肌肉、肠、脾脏、肝胰脏、头肾、心脏、卵巢、精巢组织中均有不同程度的表达.以福尔马林灭活温和气单胞菌刺激泥鳅后,泥鳅肝胰脏和脾脏组织HSC70 mRNA表达水平均在15d内显著上升,并在15 d达到峰值;头肾组织HSC70 mRNA表达量在7d迅速上升,在15 d到达峰值;在所有组织中,头肾组织中HSC70 mRNA表达量上升幅度最大,说明头肾在鱼类免疫中发挥重要的作用.
採用RT-PCR和RACE技術由泥鰍中剋隆穫得HSC70 cDNA的全長序列.結果錶明,該cDNA全長2338 bp,包括5'非翻譯區(5'-UTR) 92 bp,3'非翻譯區(3'-UTR)293 bp,開放閱讀框1953bp,編碼650箇氨基痠.預測的蛋白質分子量為71.24 ku,等電點為5.31.該蛋白含有Dnak特徵基序和2箇HSP70傢族標籤序列,胞質HSP70特徵序列及四肽簡單重複序列.該序列與草魚的相似性最高(97.5%),與人、非洲爪蟾、鷄等的相似性為87.2%~95.4%.半定量RT-PCR顯示,HSC70mRNA在正常泥鰍大腦、肌肉、腸、脾髒、肝胰髒、頭腎、心髒、卵巢、精巢組織中均有不同程度的錶達.以福爾馬林滅活溫和氣單胞菌刺激泥鰍後,泥鰍肝胰髒和脾髒組織HSC70 mRNA錶達水平均在15d內顯著上升,併在15 d達到峰值;頭腎組織HSC70 mRNA錶達量在7d迅速上升,在15 d到達峰值;在所有組織中,頭腎組織中HSC70 mRNA錶達量上升幅度最大,說明頭腎在魚類免疫中髮揮重要的作用.
채용RT-PCR화RACE기술유니추중극륭획득HSC70 cDNA적전장서렬.결과표명,해cDNA전장2338 bp,포괄5'비번역구(5'-UTR) 92 bp,3'비번역구(3'-UTR)293 bp,개방열독광1953bp,편마650개안기산.예측적단백질분자량위71.24 ku,등전점위5.31.해단백함유Dnak특정기서화2개HSP70가족표첨서렬,포질HSP70특정서렬급사태간단중복서렬.해서렬여초어적상사성최고(97.5%),여인、비주조섬、계등적상사성위87.2%~95.4%.반정량RT-PCR현시,HSC70mRNA재정상니추대뇌、기육、장、비장、간이장、두신、심장、란소、정소조직중균유불동정도적표체.이복이마림멸활온화기단포균자격니추후,니추간이장화비장조직HSC70 mRNA표체수평균재15d내현저상승,병재15 d체도봉치;두신조직HSC70 mRNA표체량재7d신속상승,재15 d도체봉치;재소유조직중,두신조직중HSC70 mRNA표체량상승폭도최대,설명두신재어류면역중발휘중요적작용.