四川大学学报(自然科学版)
四川大學學報(自然科學版)
사천대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2013年
5期
1137-1140
,共4页
张树军%严伟%白方文%白林含
張樹軍%嚴偉%白方文%白林含
장수군%엄위%백방문%백림함
脂肪酶%油体蛋白%原核表达%蛋白纯化方法
脂肪酶%油體蛋白%原覈錶達%蛋白純化方法
지방매%유체단백%원핵표체%단백순화방법
lipase%oleosin%prokaryotic expression%method of protein purification
以脂肪酶为例,探索一种利用天然油体纯化原核表达蛋白的新方法.将已经构建的脂肪酶和油体蛋白基因的融合表达载体(pET32a-Jco2-Xa-LipA),在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.提取植物天然油体在超声条件下与原核表达蛋白重构,由于油体蛋白的强疏水性和脂肪酶亲水性特性可以使得油体标记的脂肪酶固定在油体的表面.通过Factor Xa消化油体蛋白和脂肪酶之间的链接Linker后,通过离心分离,可快速实现脂肪酶的纯化.
以脂肪酶為例,探索一種利用天然油體純化原覈錶達蛋白的新方法.將已經構建的脂肪酶和油體蛋白基因的融閤錶達載體(pET32a-Jco2-Xa-LipA),在大腸桿菌BL21(DE3)中錶達.提取植物天然油體在超聲條件下與原覈錶達蛋白重構,由于油體蛋白的彊疏水性和脂肪酶親水性特性可以使得油體標記的脂肪酶固定在油體的錶麵.通過Factor Xa消化油體蛋白和脂肪酶之間的鏈接Linker後,通過離心分離,可快速實現脂肪酶的純化.
이지방매위례,탐색일충이용천연유체순화원핵표체단백적신방법.장이경구건적지방매화유체단백기인적융합표체재체(pET32a-Jco2-Xa-LipA),재대장간균BL21(DE3)중표체.제취식물천연유체재초성조건하여원핵표체단백중구,유우유체단백적강소수성화지방매친수성특성가이사득유체표기적지방매고정재유체적표면.통과Factor Xa소화유체단백화지방매지간적련접Linker후,통과리심분리,가쾌속실현지방매적순화.