四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2013年
5期
1097-1103
,共7页
蔡黎%李德款%刘志斌%冯俊%陈存%李旭锋%杨毅
蔡黎%李德款%劉誌斌%馮俊%陳存%李旭鋒%楊毅
채려%리덕관%류지빈%풍준%진존%리욱봉%양의
ABA受体蛋白%VDAC3%酵母双杂交系统
ABA受體蛋白%VDAC3%酵母雙雜交繫統
ABA수체단백%VDAC3%효모쌍잡교계통
ABA receptors%VDAC3%yeast two hybrid system
酵母双杂交技术在拟南芥cDNA文库中筛选得到了与ABA受体蛋白RCAR1,RCAR3均有相互作用的蛋白质VDAC3,并已获得VDAC3基因的全长.VDAC3蛋白包含有3个结构域,分别为Porin3结构域,DUF3442结构域和SEG片段,现根据结构域分布,将VDAC3截短为包含DUF3442的VDAC3 N以及包含SEG的VDAC3 C两段.将VDAC3全长以及分别截短的169个氨基酸(VDAC3 N)及105个氨基酸(VDAC3C)的片段进行酵母转化实验,与RCAR1或RCAR3共同转化后,VDAC3,VDAC3 N的共转酵母能够在缺陷型培养基上生长,并且使X-Gal显色为蓝色,而VDAC3 C则不能.这验证了全长的VDAC3与RCAR1,RCAR3的存在相互作用,并发现决定VDAC3蛋白与RCAR1,RCAR3是相互作用的结构域位于N端的DUF3442结构域.
酵母雙雜交技術在擬南芥cDNA文庫中篩選得到瞭與ABA受體蛋白RCAR1,RCAR3均有相互作用的蛋白質VDAC3,併已穫得VDAC3基因的全長.VDAC3蛋白包含有3箇結構域,分彆為Porin3結構域,DUF3442結構域和SEG片段,現根據結構域分佈,將VDAC3截短為包含DUF3442的VDAC3 N以及包含SEG的VDAC3 C兩段.將VDAC3全長以及分彆截短的169箇氨基痠(VDAC3 N)及105箇氨基痠(VDAC3C)的片段進行酵母轉化實驗,與RCAR1或RCAR3共同轉化後,VDAC3,VDAC3 N的共轉酵母能夠在缺陷型培養基上生長,併且使X-Gal顯色為藍色,而VDAC3 C則不能.這驗證瞭全長的VDAC3與RCAR1,RCAR3的存在相互作用,併髮現決定VDAC3蛋白與RCAR1,RCAR3是相互作用的結構域位于N耑的DUF3442結構域.
효모쌍잡교기술재의남개cDNA문고중사선득도료여ABA수체단백RCAR1,RCAR3균유상호작용적단백질VDAC3,병이획득VDAC3기인적전장.VDAC3단백포함유3개결구역,분별위Porin3결구역,DUF3442결구역화SEG편단,현근거결구역분포,장VDAC3절단위포함DUF3442적VDAC3 N이급포함SEG적VDAC3 C량단.장VDAC3전장이급분별절단적169개안기산(VDAC3 N)급105개안기산(VDAC3C)적편단진행효모전화실험,여RCAR1혹RCAR3공동전화후,VDAC3,VDAC3 N적공전효모능구재결함형배양기상생장,병차사X-Gal현색위람색,이VDAC3 C칙불능.저험증료전장적VDAC3여RCAR1,RCAR3적존재상호작용,병발현결정VDAC3단백여RCAR1,RCAR3시상호작용적결구역위우N단적DUF3442결구역.
