癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2013年
5期
338-342
,共5页
孙军培%刘久华%顾恒%黄峻松%张明聪
孫軍培%劉久華%顧恆%黃峻鬆%張明聰
손군배%류구화%고항%황준송%장명총
三氧化二砷%Apaf-1%细胞凋亡%膀胱肿瘤
三氧化二砷%Apaf-1%細胞凋亡%膀胱腫瘤
삼양화이신%Apaf-1%세포조망%방광종류
arsenic trioxide%apoptotic protease activating factor-1%apoptosis%bladder tumor
目的:观察三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡蛋白酶活化因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)基因表达的影响.方法:取处于对数生长期的T24细胞,用0.25%胰酶消化成细胞密度为1×105/mL的单细胞悬液,再用含有不同浓度(0、1、2、4、8μmol/L)As2O3的培养基作为药物组,并设置空白对照组,置于培养箱中分别培养24、48和72 h后,用二甲基四氮唑蓝(MTT)法检测As2O3对T24细胞的增殖抑制率;取T24细胞在不同浓度(0、1、2、4、8μmol/L)的As2O3培养液中培养72 h后用脱氧核糖核酸原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测细胞凋亡,用RT-PCR及Western blotting检测As2O3对Apaf-1 mRNA和蛋白表达的影响.结果:与对照组相比,2、4、8μmol/L As2O3剂量组能有效抑制T24细胞增殖,且具有剂量-反应关系(24 h时r=-0.962,P=0.038;48 h时r=-0.959,P=0.041;72 h时r=--0.973,P=0.027).As2O3于1~8μmol/L作用72 h时细胞出现典型的凋亡变化,具有剂量-反应关系(r=0.993,P=0.007);同时Apaf-1 mRNA和蛋白的表达均明显增强,且具有剂量-反应关系(mRNA:r=0.986,P=0.014;蛋白:r=0.989,P=0.000).结论:As2O3能够有效抑制膀胱癌T24细胞生长、增殖并诱导其凋亡,机制可能与其上调Apaf-1基因的表达有关.
目的:觀察三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)對人膀胱癌T24細胞增殖及凋亡蛋白酶活化因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)基因錶達的影響.方法:取處于對數生長期的T24細胞,用0.25%胰酶消化成細胞密度為1×105/mL的單細胞懸液,再用含有不同濃度(0、1、2、4、8μmol/L)As2O3的培養基作為藥物組,併設置空白對照組,置于培養箱中分彆培養24、48和72 h後,用二甲基四氮唑藍(MTT)法檢測As2O3對T24細胞的增殖抑製率;取T24細胞在不同濃度(0、1、2、4、8μmol/L)的As2O3培養液中培養72 h後用脫氧覈糖覈痠原位末耑轉移酶標記技術(TUNEL)法檢測細胞凋亡,用RT-PCR及Western blotting檢測As2O3對Apaf-1 mRNA和蛋白錶達的影響.結果:與對照組相比,2、4、8μmol/L As2O3劑量組能有效抑製T24細胞增殖,且具有劑量-反應關繫(24 h時r=-0.962,P=0.038;48 h時r=-0.959,P=0.041;72 h時r=--0.973,P=0.027).As2O3于1~8μmol/L作用72 h時細胞齣現典型的凋亡變化,具有劑量-反應關繫(r=0.993,P=0.007);同時Apaf-1 mRNA和蛋白的錶達均明顯增彊,且具有劑量-反應關繫(mRNA:r=0.986,P=0.014;蛋白:r=0.989,P=0.000).結論:As2O3能夠有效抑製膀胱癌T24細胞生長、增殖併誘導其凋亡,機製可能與其上調Apaf-1基因的錶達有關.
목적:관찰삼양화이신(arsenic trioxide,As2O3)대인방광암T24세포증식급조망단백매활화인자-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)기인표체적영향.방법:취처우대수생장기적T24세포,용0.25%이매소화성세포밀도위1×105/mL적단세포현액,재용함유불동농도(0、1、2、4、8μmol/L)As2O3적배양기작위약물조,병설치공백대조조,치우배양상중분별배양24、48화72 h후,용이갑기사담서람(MTT)법검측As2O3대T24세포적증식억제솔;취T24세포재불동농도(0、1、2、4、8μmol/L)적As2O3배양액중배양72 h후용탈양핵당핵산원위말단전이매표기기술(TUNEL)법검측세포조망,용RT-PCR급Western blotting검측As2O3대Apaf-1 mRNA화단백표체적영향.결과:여대조조상비,2、4、8μmol/L As2O3제량조능유효억제T24세포증식,차구유제량-반응관계(24 h시r=-0.962,P=0.038;48 h시r=-0.959,P=0.041;72 h시r=--0.973,P=0.027).As2O3우1~8μmol/L작용72 h시세포출현전형적조망변화,구유제량-반응관계(r=0.993,P=0.007);동시Apaf-1 mRNA화단백적표체균명현증강,차구유제량-반응관계(mRNA:r=0.986,P=0.014;단백:r=0.989,P=0.000).결론:As2O3능구유효억제방광암T24세포생장、증식병유도기조망,궤제가능여기상조Apaf-1기인적표체유관.