畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2013年
9期
1475-1480
,共6页
吴力专%罗佳捷%张彬%占今舜%李丽立
吳力專%囉佳捷%張彬%佔今舜%李麗立
오력전%라가첩%장빈%점금순%리려립
金属硫蛋白%奶牛脾淋巴细胞%细胞凋亡%细胞坏死%线粒体膜电位
金屬硫蛋白%奶牛脾淋巴細胞%細胞凋亡%細胞壞死%線粒體膜電位
금속류단백%내우비림파세포%세포조망%세포배사%선립체막전위
metallothionein%cow spleen lymphocytes%apoptosis%necrosis%mitochondrial membrane voltage
观察金属硫蛋白(MT)对热应激奶牛脾淋巴细胞凋亡的影响,研究MT对热氧化应激引起的细胞凋亡/坏死及线粒体膜电位(△Ψ m)的调节.采用荧光显微镜观察细胞凋亡现象;Annexin V-PI双染法测定细胞凋亡率和坏死率;以JC-1为装载探针测定△Ψm值.结果显示MT只对高热应激诱导的细胞凋亡有抑制作用,MT为5.25~8.25μg·mL 1时,对正常细胞凋亡有轻微促进作用;低浓度MT(2.25 μg·mL-)轻微促进细胞坏死;MT可提高细胞线粒体膜电位,其中高热诱导细胞所需MT浓度高,而正常细胞需MT浓度宜适中(3.75~6.75 μg·mL-1),其它浓度则不能充分保护细胞.结论:1h、43℃处理牛脾淋巴细胞,可提高细胞线粒体膜电位,但同时也导致细胞坏死率增加,而添加MT不仅提高细胞线粒体膜电压,对热应激导致的细胞坏死具有较好的抑制作用,因此MT保护细胞比热处理更具有现实的意义,同时也说明线粒体通路是MT调节细胞凋亡/坏死的信号转导通路之一.
觀察金屬硫蛋白(MT)對熱應激奶牛脾淋巴細胞凋亡的影響,研究MT對熱氧化應激引起的細胞凋亡/壞死及線粒體膜電位(△Ψ m)的調節.採用熒光顯微鏡觀察細胞凋亡現象;Annexin V-PI雙染法測定細胞凋亡率和壞死率;以JC-1為裝載探針測定△Ψm值.結果顯示MT隻對高熱應激誘導的細胞凋亡有抑製作用,MT為5.25~8.25μg·mL 1時,對正常細胞凋亡有輕微促進作用;低濃度MT(2.25 μg·mL-)輕微促進細胞壞死;MT可提高細胞線粒體膜電位,其中高熱誘導細胞所需MT濃度高,而正常細胞需MT濃度宜適中(3.75~6.75 μg·mL-1),其它濃度則不能充分保護細胞.結論:1h、43℃處理牛脾淋巴細胞,可提高細胞線粒體膜電位,但同時也導緻細胞壞死率增加,而添加MT不僅提高細胞線粒體膜電壓,對熱應激導緻的細胞壞死具有較好的抑製作用,因此MT保護細胞比熱處理更具有現實的意義,同時也說明線粒體通路是MT調節細胞凋亡/壞死的信號轉導通路之一.
관찰금속류단백(MT)대열응격내우비림파세포조망적영향,연구MT대열양화응격인기적세포조망/배사급선립체막전위(△Ψ m)적조절.채용형광현미경관찰세포조망현상;Annexin V-PI쌍염법측정세포조망솔화배사솔;이JC-1위장재탐침측정△Ψm치.결과현시MT지대고열응격유도적세포조망유억제작용,MT위5.25~8.25μg·mL 1시,대정상세포조망유경미촉진작용;저농도MT(2.25 μg·mL-)경미촉진세포배사;MT가제고세포선립체막전위,기중고열유도세포소수MT농도고,이정상세포수MT농도의괄중(3.75~6.75 μg·mL-1),기타농도칙불능충분보호세포.결론:1h、43℃처리우비림파세포,가제고세포선립체막전위,단동시야도치세포배사솔증가,이첨가MT불부제고세포선립체막전압,대열응격도치적세포배사구유교호적억제작용,인차MT보호세포비열처리경구유현실적의의,동시야설명선립체통로시MT조절세포조망/배사적신호전도통로지일.