东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
9期
73-80
,共8页
曹永生%高明春%曹翀%张润祥%李迪%王欢%王君伟
曹永生%高明春%曹翀%張潤祥%李迪%王歡%王君偉
조영생%고명춘%조충%장윤상%리적%왕환%왕군위
Asia1型FMDV衣壳蛋白%毕赤酵母%共表达%抗原性%免疫原性
Asia1型FMDV衣殼蛋白%畢赤酵母%共錶達%抗原性%免疫原性
Asia1형FMDV의각단백%필적효모%공표체%항원성%면역원성
capsid proteins of Asia1 type FMDV%Pichia pastoris%co-expression%immunoreactivity%immunogenicity
为研究Asia1型口蹄疫病毒衣壳蛋白在毕赤酵母中共表达及其免疫原性,本研究基于酵母细胞内表达载体pPICZA,利用独立编码三个衣壳蛋白表达盒构建质粒pPICZA-vp031,重组质粒经BglⅡ线性化后进行电转化,获得重组有三个独立表达盒重组酵母菌.SDS-PAGE和Western blot检测结果表明衣壳蛋白均得到正确表达且具有良好抗原性.重组酵母菌经口服免疫小鼠后,机体能够产生血清特异性IgG抗体和黏膜gIgA抗体,淋巴细胞增殖结果显示免疫小鼠淋巴细胞特异性增殖指数显著高于灭活疫苗组,细胞因子检测结果显示经特异性抗原刺激免疫小鼠淋巴细胞分泌IL-4和IL-10与灭活疫苗组无显著差异,显著高于PBS对照组,表明重组菌能够刺激机体产生特异性细胞免疫应答.本研究为口蹄疫基因工程疫苗研制奠定基础.
為研究Asia1型口蹄疫病毒衣殼蛋白在畢赤酵母中共錶達及其免疫原性,本研究基于酵母細胞內錶達載體pPICZA,利用獨立編碼三箇衣殼蛋白錶達盒構建質粒pPICZA-vp031,重組質粒經BglⅡ線性化後進行電轉化,穫得重組有三箇獨立錶達盒重組酵母菌.SDS-PAGE和Western blot檢測結果錶明衣殼蛋白均得到正確錶達且具有良好抗原性.重組酵母菌經口服免疫小鼠後,機體能夠產生血清特異性IgG抗體和黏膜gIgA抗體,淋巴細胞增殖結果顯示免疫小鼠淋巴細胞特異性增殖指數顯著高于滅活疫苗組,細胞因子檢測結果顯示經特異性抗原刺激免疫小鼠淋巴細胞分泌IL-4和IL-10與滅活疫苗組無顯著差異,顯著高于PBS對照組,錶明重組菌能夠刺激機體產生特異性細胞免疫應答.本研究為口蹄疫基因工程疫苗研製奠定基礎.
위연구Asia1형구제역병독의각단백재필적효모중공표체급기면역원성,본연구기우효모세포내표체재체pPICZA,이용독립편마삼개의각단백표체합구건질립pPICZA-vp031,중조질립경BglⅡ선성화후진행전전화,획득중조유삼개독립표체합중조효모균.SDS-PAGE화Western blot검측결과표명의각단백균득도정학표체차구유량호항원성.중조효모균경구복면역소서후,궤체능구산생혈청특이성IgG항체화점막gIgA항체,림파세포증식결과현시면역소서림파세포특이성증식지수현저고우멸활역묘조,세포인자검측결과현시경특이성항원자격면역소서림파세포분비IL-4화IL-10여멸활역묘조무현저차이,현저고우PBS대조조,표명중조균능구자격궤체산생특이성세포면역응답.본연구위구제역기인공정역묘연제전정기출.
