东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
9期
68-72
,共5页
冯兴军%李静%宋雪莹%许文杉%邢丽维%柳迪
馮興軍%李靜%宋雪瑩%許文杉%邢麗維%柳迪
풍흥군%리정%송설형%허문삼%형려유%류적
抗菌肽%毕赤酵母%重组表达%MIC
抗菌肽%畢赤酵母%重組錶達%MIC
항균태%필적효모%중조표체%MIC
antimicrobial peptides%pichia pastoris%recombination expression%MIC
将4种抗菌肽Fowlicidin-2、Cecropin B、Cecropin A(1-8)-Melittin(1-18)和Thanatin串联,并在每种抗菌肽N-末端加上Kex2蛋白酶裂解位点,根据毕赤酵母密码子偏爱性,化学合成四种抗菌肽(Fusion Antimicrobial Peptides,FAPs)编码基因,连接到pPICZαC载体中,构建分泌型重组表达载体并转化毕赤酵母.经甲醇诱导后,Tricine-SDS-PAGE分析获得与目蛋白大小一致特异表达蛋白条带,每升发酵液上清含量达到32 mg.初步鉴定FAPs对大肠杆菌(E.coli) ATCC25922、金黄色葡萄球菌(S.aureus) ATCC25923、鼠伤寒沙门氏菌(S.syphimurium C77-31和绿脓杆菌(P.aeruginosa)ATCC27853均有抑菌活性,且对S.aureus ATCC25923活性最强,最小抑菌浓度MIC为8.0 μg·mL-1.
將4種抗菌肽Fowlicidin-2、Cecropin B、Cecropin A(1-8)-Melittin(1-18)和Thanatin串聯,併在每種抗菌肽N-末耑加上Kex2蛋白酶裂解位點,根據畢赤酵母密碼子偏愛性,化學閤成四種抗菌肽(Fusion Antimicrobial Peptides,FAPs)編碼基因,連接到pPICZαC載體中,構建分泌型重組錶達載體併轉化畢赤酵母.經甲醇誘導後,Tricine-SDS-PAGE分析穫得與目蛋白大小一緻特異錶達蛋白條帶,每升髮酵液上清含量達到32 mg.初步鑒定FAPs對大腸桿菌(E.coli) ATCC25922、金黃色葡萄毬菌(S.aureus) ATCC25923、鼠傷寒沙門氏菌(S.syphimurium C77-31和綠膿桿菌(P.aeruginosa)ATCC27853均有抑菌活性,且對S.aureus ATCC25923活性最彊,最小抑菌濃度MIC為8.0 μg·mL-1.
장4충항균태Fowlicidin-2、Cecropin B、Cecropin A(1-8)-Melittin(1-18)화Thanatin천련,병재매충항균태N-말단가상Kex2단백매렬해위점,근거필적효모밀마자편애성,화학합성사충항균태(Fusion Antimicrobial Peptides,FAPs)편마기인,련접도pPICZαC재체중,구건분비형중조표체재체병전화필적효모.경갑순유도후,Tricine-SDS-PAGE분석획득여목단백대소일치특이표체단백조대,매승발효액상청함량체도32 mg.초보감정FAPs대대장간균(E.coli) ATCC25922、금황색포도구균(S.aureus) ATCC25923、서상한사문씨균(S.syphimurium C77-31화록농간균(P.aeruginosa)ATCC27853균유억균활성,차대S.aureus ATCC25923활성최강,최소억균농도MIC위8.0 μg·mL-1.
