CAJ | 학술논문

目的建立小鼠骨髓瘤耐阿霉素(ADM)细胞系SP2/0/ADM,研究青蒿琥酯(ART)对其的影响.方法 ADM低浓度加量持续诱导法建立耐药细胞株;罗丹明123(Rh123)排出实验观察SP2/0/ADM细胞对药物外排情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验分析SP2/0/ADM细胞株耐药谱和ART对SP2/0/ADM细胞的增殖抑制作用及耐药逆转作用;通过Western blot法检测10μg/ml ART作用24、48、72、96 h后,SP2/0/ADM细胞P-糖蛋白(P-gp)表达变化.结果 MTT实验结果显示,SP2/0/ADM细胞不但对ADM产生了耐药性[耐药指数(RI)为22.6],对米托蒽醌、足叶已苷和甲氨蝶呤也产生了不同程度交叉耐药,其RI分别为4.1、2.8和5.3.Rh123排出实验结果显示SP2/0/ADM细胞荧光强度低,而SP2/0细胞中荧光强度高.随ART浓度增加,对SP2/0/ADM细胞增殖抑制作用增强,呈剂量依赖性(P＜0.05),其20％抑制浓度(IC20)约为0.3 μg/ml.选此浓度进行耐药逆转实验,结果显示ART可增强ADM对SP2/0/ADM细胞的毒性作用,其半数药物抑制浓度(IC50)由17.81 μg/ml降至4.26 μg/ml,耐药逆转倍数为4.15倍(P＜0.05).随ART作用时间延长,SP2/0/ADM细胞P-gp蛋白表达水平呈下降趋势.与对照组(6568.25±156.93)比较,ART作用24、48、72、96 h组P-gp蛋白灰度值分别为(4 459.12±297.13)、(4218.35 ± 153.21)、(3558.52±241.38)、(3024.85±157.33),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SP2/0/ADM细胞株是成功的骨髓瘤耐药细胞株;ART能逆转SP2/0/ADM细胞对ADM耐药;ART抑制P-gp蛋白表达是其重要作用机制.
목적 건립소서골수류내아매소(ADM)세포계SP2/0/ADM,연구청호호지(ART)대기적영향.방법 ADM저농도가량지속유도법건립내약세포주;라단명123(Rh123)배출실험관찰SP2/0/ADM세포대약물외배정황;채용사갑기우담서람(MTT)실험분석SP2/0/ADM세포주내약보화ART대SP2/0/ADM세포적증식억제작용급내약역전작용;통과Western blot법검측10μg/ml ART작용24、48、72、96 h후,SP2/0/ADM세포P-당단백(P-gp)표체변화.결과 MTT실험결과현시,SP2/0/ADM세포불단대ADM산생료내약성[내약지수(RI)위22.6],대미탁은곤、족협이감화갑안접령야산생료불동정도교차내약,기RI분별위4.1、2.8화5.3.Rh123배출실험결과현시SP2/0/ADM세포형광강도저,이SP2/0세포중형광강도고.수ART농도증가,대SP2/0/ADM세포증식억제작용증강,정제량의뢰성(P＜0.05),기20％억제농도(IC20)약위0.3 μg/ml.선차농도진행내약역전실험,결과현시ART가증강ADM대SP2/0/ADM세포적독성작용,기반수약물억제농도(IC50)유17.81 μg/ml강지4.26 μg/ml,내약역전배수위4.15배(P＜0.05).수ART작용시간연장,SP2/0/ADM세포P-gp단백표체수평정하강추세.여대조조(6568.25±156.93)비교,ART작용24、48、72、96 h조P-gp단백회도치분별위(4 459.12±297.13)、(4218.35 ± 153.21)、(3558.52±241.38)、(3024.85±157.33),차이유통계학의의(P＜0.05).결론 SP2/0/ADM세포주시성공적골수류내약세포주;ART능역전SP2/0/ADM세포대ADM내약;ART억제P-gp단백표체시기중요작용궤제.