南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
2期
184-188
,共5页
赵博%李景剑%符支宏%钟树华
趙博%李景劍%符支宏%鐘樹華
조박%리경검%부지굉%종수화
大旗瓣凤仙%ISSR-PCR%反应体系%优化%正交设计
大旂瓣鳳仙%ISSR-PCR%反應體繫%優化%正交設計
대기판봉선%ISSR-PCR%반응체계%우화%정교설계
Impatiens macrovexilla Y.L.Chen%ISSR-PCR%reaction system%optimization%orthogonal design
[目的]优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系,为大旗瓣凤仙遗传多样性分析提供技术参考.[方法]利用正交试验设计对大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系的5个因素(Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA)4水平进行优化分析,并在此基础上对PCR反应过程中的退火温度进行筛选.[结果]建立了大旗瓣凤仙ISSR-PCR的优化反应体系,即在25.0 μL反应体系中含1×PCR Buffer、Mg+ 1.5 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、TaqDNA聚合酶0.75～1.00 U、模板DNA 100 ng.通过该体系可以筛选出6条对大旗瓣凤仙种群扩增效果较好的引物.[结论]优化的ISSR-PCR反应体系具有较高的稳定性,可用于大旗瓣凤仙及凤仙属植物种群的ISSR遗传多样性分析.
[目的]優化大旂瓣鳳仙ISSR-PCR反應體繫,為大旂瓣鳳仙遺傳多樣性分析提供技術參攷.[方法]利用正交試驗設計對大旂瓣鳳仙ISSR-PCR反應體繫的5箇因素(Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚閤酶、模闆DNA)4水平進行優化分析,併在此基礎上對PCR反應過程中的退火溫度進行篩選.[結果]建立瞭大旂瓣鳳仙ISSR-PCR的優化反應體繫,即在25.0 μL反應體繫中含1×PCR Buffer、Mg+ 1.5 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、TaqDNA聚閤酶0.75～1.00 U、模闆DNA 100 ng.通過該體繫可以篩選齣6條對大旂瓣鳳仙種群擴增效果較好的引物.[結論]優化的ISSR-PCR反應體繫具有較高的穩定性,可用于大旂瓣鳳仙及鳳仙屬植物種群的ISSR遺傳多樣性分析.
[목적]우화대기판봉선ISSR-PCR반응체계,위대기판봉선유전다양성분석제공기술삼고.[방법]이용정교시험설계대대기판봉선ISSR-PCR반응체계적5개인소(Mg2+、dNTP、인물、TaqDNA취합매、모판DNA)4수평진행우화분석,병재차기출상대PCR반응과정중적퇴화온도진행사선.[결과]건립료대기판봉선ISSR-PCR적우화반응체계,즉재25.0 μL반응체계중함1×PCR Buffer、Mg+ 1.5 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、인물0.8 μmol/L、TaqDNA취합매0.75～1.00 U、모판DNA 100 ng.통과해체계가이사선출6조대대기판봉선충군확증효과교호적인물.[결론]우화적ISSR-PCR반응체계구유교고적은정성,가용우대기판봉선급봉선속식물충군적ISSR유전다양성분석.
