中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2014年
9期
1213-1217,1223
,共6页
叶力文%邓玮%陈庆伟%柯大智%李桂琼
葉力文%鄧瑋%陳慶偉%柯大智%李桂瓊
협력문%산위%진경위%가대지%리계경
CD47%骨髓间充质干细胞%重组质粒%转染%表达
CD47%骨髓間充質榦細胞%重組質粒%轉染%錶達
CD47%골수간충질간세포%중조질립%전염%표체
CD47 gene%Bone marrow mesenchymal stem cells%Recombinant plasmid%Expression%Transfection
目的:构建CD47重组质粒并将其转染至大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs),建立稳定过表达CD47的BMMSCs,为研究干细胞治疗中逃避免疫监视的有关机制提供实验模型.方法:构建过表达CD47基因的质粒载体,转染至分离培养的大鼠BMMSCs,RT-PCR、Western blot分别检测干细胞CD47 mRNA、蛋白水平的表达,并完成功能检测.结果:成功构建了pYr-ads-4-ratCD47质粒,经酶切、测序结果表明pYr-ads-4-ratCD47重组质粒构建成功;RT-PCR、Western blot显示实验组转染至大鼠BMMSCs后CD47的mRNA和蛋白水平表达明显增高(P＜0.05);功能检测提示过表达CD47分子的BMMSCs成功逃避巨噬细胞吞噬.结论:经质粒介导可成功将大鼠CD47目的基因片段转染至大鼠BMMSCs,并能够在体外有效的过表达.
目的:構建CD47重組質粒併將其轉染至大鼠骨髓間充質榦細胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs),建立穩定過錶達CD47的BMMSCs,為研究榦細胞治療中逃避免疫鑑視的有關機製提供實驗模型.方法:構建過錶達CD47基因的質粒載體,轉染至分離培養的大鼠BMMSCs,RT-PCR、Western blot分彆檢測榦細胞CD47 mRNA、蛋白水平的錶達,併完成功能檢測.結果:成功構建瞭pYr-ads-4-ratCD47質粒,經酶切、測序結果錶明pYr-ads-4-ratCD47重組質粒構建成功;RT-PCR、Western blot顯示實驗組轉染至大鼠BMMSCs後CD47的mRNA和蛋白水平錶達明顯增高(P＜0.05);功能檢測提示過錶達CD47分子的BMMSCs成功逃避巨噬細胞吞噬.結論:經質粒介導可成功將大鼠CD47目的基因片段轉染至大鼠BMMSCs,併能夠在體外有效的過錶達.
목적:구건CD47중조질립병장기전염지대서골수간충질간세포(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs),건립은정과표체CD47적BMMSCs,위연구간세포치료중도피면역감시적유관궤제제공실험모형.방법:구건과표체CD47기인적질립재체,전염지분리배양적대서BMMSCs,RT-PCR、Western blot분별검측간세포CD47 mRNA、단백수평적표체,병완성공능검측.결과:성공구건료pYr-ads-4-ratCD47질립,경매절、측서결과표명pYr-ads-4-ratCD47중조질립구건성공;RT-PCR、Western blot현시실험조전염지대서BMMSCs후CD47적mRNA화단백수평표체명현증고(P＜0.05);공능검측제시과표체CD47분자적BMMSCs성공도피거서세포탄서.결론:경질립개도가성공장대서CD47목적기인편단전염지대서BMMSCs,병능구재체외유효적과표체.
