江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2012年
6期
461-464
,共4页
高升%刘月芳%田伊卿%吉滢%曾子涵%殷丝雨%邵启祥
高升%劉月芳%田伊卿%吉瀅%曾子涵%慇絲雨%邵啟祥
고승%류월방%전이경%길형%증자함%은사우%소계상
蛋白转导结构域%高迁移率族蛋白1%融合蛋白%mLumin
蛋白轉導結構域%高遷移率族蛋白1%融閤蛋白%mLumin
단백전도결구역%고천이솔족단백1%융합단백%mLumin
目的:构建含有蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)和荧光蛋白mLumin的人HMGB1 A盒原核表达载体,表达并纯化PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白.方法:利用基因重组技术构建pET28a-PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白原核表达载体,并在大肠埃希菌Rosette(DE3)中表达融合蛋白,经Ni2+分离柱纯化PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,激光共聚焦显微镜观察其穿膜能力.结果:成功构建了PTD-mLumin-HMGB1 A原核表达载体,并表达和纯化了PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,该融合蛋白能高效地穿过细胞膜进入细胞内.结论:成功地表达和纯化了PTD-mLumin-HMGB1 A融合蛋白,此融合蛋白具有良好的穿膜能力,为更好地研究HMGB1 A的细胞内定位和体内定位提供了重要的依据.
目的:構建含有蛋白轉導結構域(protein transduction domain,PTD)和熒光蛋白mLumin的人HMGB1 A盒原覈錶達載體,錶達併純化PTD-mLumin-HMGB1 A融閤蛋白.方法:利用基因重組技術構建pET28a-PTD-mLumin-HMGB1 A融閤蛋白原覈錶達載體,併在大腸埃希菌Rosette(DE3)中錶達融閤蛋白,經Ni2+分離柱純化PTD-mLumin-HMGB1 A融閤蛋白,激光共聚焦顯微鏡觀察其穿膜能力.結果:成功構建瞭PTD-mLumin-HMGB1 A原覈錶達載體,併錶達和純化瞭PTD-mLumin-HMGB1 A融閤蛋白,該融閤蛋白能高效地穿過細胞膜進入細胞內.結論:成功地錶達和純化瞭PTD-mLumin-HMGB1 A融閤蛋白,此融閤蛋白具有良好的穿膜能力,為更好地研究HMGB1 A的細胞內定位和體內定位提供瞭重要的依據.
목적:구건함유단백전도결구역(protein transduction domain,PTD)화형광단백mLumin적인HMGB1 A합원핵표체재체,표체병순화PTD-mLumin-HMGB1 A융합단백.방법:이용기인중조기술구건pET28a-PTD-mLumin-HMGB1 A융합단백원핵표체재체,병재대장애희균Rosette(DE3)중표체융합단백,경Ni2+분리주순화PTD-mLumin-HMGB1 A융합단백,격광공취초현미경관찰기천막능력.결과:성공구건료PTD-mLumin-HMGB1 A원핵표체재체,병표체화순화료PTD-mLumin-HMGB1 A융합단백,해융합단백능고효지천과세포막진입세포내.결론:성공지표체화순화료PTD-mLumin-HMGB1 A융합단백,차융합단백구유량호적천막능력,위경호지연구HMGB1 A적세포내정위화체내정위제공료중요적의거.
