山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2012年
11期
808-812,885
,共6页
Beclin 1%顺铂%内质网应激%自噬%宫颈癌
Beclin 1%順鉑%內質網應激%自噬%宮頸癌
Beclin 1%순박%내질망응격%자서%궁경암
目的 研究内质网应激-自噬反应在顺铂诱导宫颈癌HeLa细胞死亡中的作用,以及自噬基因Beclin 1对HeLa细胞顺铂敏感性的影响. 方法 不同浓度顺铂作用HeLa细胞后,丹磺酰戊二胺染色法观察细胞中自噬体的形成,Western blot 检测自噬相关蛋白Beclin 1和LC3的表达及内质网应激相关蛋白IRE1、PERK和ATF6的表达.将自噬基因Beclin 1的真核表达载体pcDNA3.1(+)-Beclin1转染HeLa细胞,Western blot检测Beclin 1在HeLa细胞中的蛋白表达,噻唑蓝比色(MTT)法检测顺铂对HeLa细胞半数抑制浓度(IC50)的变化,流式细胞仪检测凋亡细胞的百分率. 结果 顺铂作用HeLa细胞后,细胞内自噬体形成增加,自噬蛋白Beclin 1和LC3表达增加,且均呈现时间依赖性(P＜0.05),内质网应激相关蛋白IRE1、PERK和ATF6的表达增强.pcDNA3.1(+)-Beclin1转染HeLa后,Beclin 1蛋白表达增加(P＜0.05)；MTT检测IC50由转染前的1.0μg/ml下降到0.5 μg/ml；凋亡细胞百分率升高,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 内质网应激-自噬反应参与了顺铂对宫颈癌HeLa细胞的细胞毒性作用,自噬基因Beclin 1过表达能够增加HeLa细胞对顺铂的敏感性.
目的 研究內質網應激-自噬反應在順鉑誘導宮頸癌HeLa細胞死亡中的作用,以及自噬基因Beclin 1對HeLa細胞順鉑敏感性的影響. 方法 不同濃度順鉑作用HeLa細胞後,丹磺酰戊二胺染色法觀察細胞中自噬體的形成,Western blot 檢測自噬相關蛋白Beclin 1和LC3的錶達及內質網應激相關蛋白IRE1、PERK和ATF6的錶達.將自噬基因Beclin 1的真覈錶達載體pcDNA3.1(+)-Beclin1轉染HeLa細胞,Western blot檢測Beclin 1在HeLa細胞中的蛋白錶達,噻唑藍比色(MTT)法檢測順鉑對HeLa細胞半數抑製濃度(IC50)的變化,流式細胞儀檢測凋亡細胞的百分率. 結果 順鉑作用HeLa細胞後,細胞內自噬體形成增加,自噬蛋白Beclin 1和LC3錶達增加,且均呈現時間依賴性(P＜0.05),內質網應激相關蛋白IRE1、PERK和ATF6的錶達增彊.pcDNA3.1(+)-Beclin1轉染HeLa後,Beclin 1蛋白錶達增加(P＜0.05)；MTT檢測IC50由轉染前的1.0μg/ml下降到0.5 μg/ml；凋亡細胞百分率升高,與對照組相比差異有統計學意義(P＜0.05). 結論 內質網應激-自噬反應參與瞭順鉑對宮頸癌HeLa細胞的細胞毒性作用,自噬基因Beclin 1過錶達能夠增加HeLa細胞對順鉑的敏感性.
목적 연구내질망응격-자서반응재순박유도궁경암HeLa세포사망중적작용,이급자서기인Beclin 1대HeLa세포순박민감성적영향. 방법 불동농도순박작용HeLa세포후,단광선무이알염색법관찰세포중자서체적형성,Western blot 검측자서상관단백Beclin 1화LC3적표체급내질망응격상관단백IRE1、PERK화ATF6적표체.장자서기인Beclin 1적진핵표체재체pcDNA3.1(+)-Beclin1전염HeLa세포,Western blot검측Beclin 1재HeLa세포중적단백표체,새서람비색(MTT)법검측순박대HeLa세포반수억제농도(IC50)적변화,류식세포의검측조망세포적백분솔. 결과 순박작용HeLa세포후,세포내자서체형성증가,자서단백Beclin 1화LC3표체증가,차균정현시간의뢰성(P＜0.05),내질망응격상관단백IRE1、PERK화ATF6적표체증강.pcDNA3.1(+)-Beclin1전염HeLa후,Beclin 1단백표체증가(P＜0.05)；MTT검측IC50유전염전적1.0μg/ml하강도0.5 μg/ml；조망세포백분솔승고,여대조조상비차이유통계학의의(P＜0.05). 결론 내질망응격-자서반응삼여료순박대궁경암HeLa세포적세포독성작용,자서기인Beclin 1과표체능구증가HeLa세포대순박적민감성.
