中国当代医药
中國噹代醫藥
중국당대의약
PERSON
2012年
35期
13-15
,共3页
李志广%张现伟%蒋小梅%旷兴林%魏大鹏%章崇杰
李誌廣%張現偉%蔣小梅%曠興林%魏大鵬%章崇傑
리지엄%장현위%장소매%광흥림%위대붕%장숭걸
细胞分裂周期蛋白激酶7%单克隆抗体%DNA复制%制备%鉴定
細胞分裂週期蛋白激酶7%單剋隆抗體%DNA複製%製備%鑒定
세포분렬주기단백격매7%단극륭항체%DNA복제%제비%감정
目的 制备抗人CDC7蛋白的单克隆抗体并鉴定其生物学特性.方法 以GST-CDC7为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗人CDC7单克隆抗体的杂交瘤细胞株.用间接ELISA,Western Blot,免疫细胞化学(ICC)对此抗体特性进行鉴定.结果 筛选到1株能稳定分泌抗人CDC7的细胞株1F7D2C9.亚类鉴定为IgG2a,轻链为kappa链,ELISA法鉴定该抗体腹水效价为1∶102 400,抗体亲和常数为1.558×109 L/mol,Western Blotting分析表明,此抗体能特异识别细胞株的天然CDC7蛋白质.免疫细胞化学进一步显示CDC7分布于细胞核中.结论 成功制备了抗人CDC7单克隆抗体,为研究CDC7与细胞癌变的关系建立了基础.
目的 製備抗人CDC7蛋白的單剋隆抗體併鑒定其生物學特性.方法 以GST-CDC7為免疫原,免疫Balb/c小鼠,取其脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞(SP2/0細胞)融閤,經多次篩選及剋隆化,建立可以穩定分泌抗人CDC7單剋隆抗體的雜交瘤細胞株.用間接ELISA,Western Blot,免疫細胞化學(ICC)對此抗體特性進行鑒定.結果 篩選到1株能穩定分泌抗人CDC7的細胞株1F7D2C9.亞類鑒定為IgG2a,輕鏈為kappa鏈,ELISA法鑒定該抗體腹水效價為1∶102 400,抗體親和常數為1.558×109 L/mol,Western Blotting分析錶明,此抗體能特異識彆細胞株的天然CDC7蛋白質.免疫細胞化學進一步顯示CDC7分佈于細胞覈中.結論 成功製備瞭抗人CDC7單剋隆抗體,為研究CDC7與細胞癌變的關繫建立瞭基礎.
목적 제비항인CDC7단백적단극륭항체병감정기생물학특성.방법 이GST-CDC7위면역원,면역Balb/c소서,취기비세포여소서골수류세포(SP2/0세포)융합,경다차사선급극륭화,건립가이은정분비항인CDC7단극륭항체적잡교류세포주.용간접ELISA,Western Blot,면역세포화학(ICC)대차항체특성진행감정.결과 사선도1주능은정분비항인CDC7적세포주1F7D2C9.아류감정위IgG2a,경련위kappa련,ELISA법감정해항체복수효개위1∶102 400,항체친화상수위1.558×109 L/mol,Western Blotting분석표명,차항체능특이식별세포주적천연CDC7단백질.면역세포화학진일보현시CDC7분포우세포핵중.결론 성공제비료항인CDC7단극륭항체,위연구CDC7여세포암변적관계건립료기출.
