福建农林大学学报（自然科学版）
福建農林大學學報（自然科學版）
복건농림대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2013年
1期
57-62
,共6页
陈华%姜宝杰%张冲%蔡铁城%曾建斌%邓烨%庄伟建
陳華%薑寶傑%張遲%蔡鐵城%曾建斌%鄧燁%莊偉建
진화%강보걸%장충%채철성%증건빈%산엽%장위건
果皮%花生%SMART技术%cDNA文库
果皮%花生%SMART技術%cDNA文庫
과피%화생%SMART기술%cDNA문고
以闽花6号花生为材料,利用SMART技术构建了花生果皮全长cDNA文库.从花生果皮中分离、纯化的cDNA片段连接到经sfiI酶切的pDNR-LIB载体上,经电击转化获得原始文库,经过涂平板测定和酶切反应快速鉴定表明,原始文库滴度达1.3×107 cfu,重组率达95.5％,插入片段大小多为750-2000 bp,平均大小在1000 bp左右.随机挑选30个单克隆进行双向测序,获得有效序列25条,序列经GenBank检索和生物信息学比较,17个获得了全长,所占比例为68％.有13条序列与其他植物已知功能氨基酸序列具有较高的相似性.说明得到了高质量的全长cDNA文库,这为筛选和克隆花生果皮特异表达基因和分离果皮特异启动子提供了基础.
以閩花6號花生為材料,利用SMART技術構建瞭花生果皮全長cDNA文庫.從花生果皮中分離、純化的cDNA片段連接到經sfiI酶切的pDNR-LIB載體上,經電擊轉化穫得原始文庫,經過塗平闆測定和酶切反應快速鑒定錶明,原始文庫滴度達1.3×107 cfu,重組率達95.5％,插入片段大小多為750-2000 bp,平均大小在1000 bp左右.隨機挑選30箇單剋隆進行雙嚮測序,穫得有效序列25條,序列經GenBank檢索和生物信息學比較,17箇穫得瞭全長,所佔比例為68％.有13條序列與其他植物已知功能氨基痠序列具有較高的相似性.說明得到瞭高質量的全長cDNA文庫,這為篩選和剋隆花生果皮特異錶達基因和分離果皮特異啟動子提供瞭基礎.
이민화6호화생위재료,이용SMART기술구건료화생과피전장cDNA문고.종화생과피중분리、순화적cDNA편단련접도경sfiI매절적pDNR-LIB재체상,경전격전화획득원시문고,경과도평판측정화매절반응쾌속감정표명,원시문고적도체1.3×107 cfu,중조솔체95.5％,삽입편단대소다위750-2000 bp,평균대소재1000 bp좌우.수궤도선30개단극륭진행쌍향측서,획득유효서렬25조,서렬경GenBank검색화생물신식학비교,17개획득료전장,소점비례위68％.유13조서렬여기타식물이지공능안기산서렬구유교고적상사성.설명득도료고질량적전장cDNA문고,저위사선화극륭화생과피특이표체기인화분리과피특이계동자제공료기출.
