胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2008年
12期
975-978
,共4页
刘萍%田德安%夏丽敏%晏维%徐倩%徐湖波
劉萍%田德安%夏麗敏%晏維%徐倩%徐湖波
류평%전덕안%하려민%안유%서천%서호파
癌,肝细胞%HepG2细胞%Smad4基因
癌,肝細胞%HepG2細胞%Smad4基因
암,간세포%HepG2세포%Smad4기인
目的 研究抑癌基因Smad4对人肝癌细胞株HepG2生长的影响,并探讨其作用机制.方法 采用脂质体瞬时转染法转染PFTX-5 Smad4质粒至人肝癌细胞株HepG2(实验组),以转染空质粒PFTX-5的HepG2细胞为对照组,野生型HepG2细胞为空白组,利用免疫印迹(Western blot)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Smad4及血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化;用MTT法检测细胞增殖及用FITC-Annexin V、碘化吡啶(propidiumiodide,PI)双染后流式细胞仪(FCM)检测细胞周期和凋亡情况,Westernblot检测细胞周期素D1(Cyelin D1)表达差异.结果 PFTX-5 Smad4瞬时转染到肝癌细胞后,实验组与对照组和空白组相比,Smad4 mRNA和蛋白表达明显上升(P<0.05),而VEGF mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05).实验组细胞CyclinD1表达明显下降(P<0.05),细胞周期时相分布出现合成前期(G0/G1期)阻滞.实验组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),增殖受到明显抑制.结论 Smad4高表达可能通过降低肝癌细胞中VEGF的表达,抑制cyclinD1转录合成,并诱导强烈的G1期阻滞和细胞凋亡,对细胞的增殖有明显的抑制作用,为进一步研究肝癌生长增殖机制提供了实验基础.
目的 研究抑癌基因Smad4對人肝癌細胞株HepG2生長的影響,併探討其作用機製.方法 採用脂質體瞬時轉染法轉染PFTX-5 Smad4質粒至人肝癌細胞株HepG2(實驗組),以轉染空質粒PFTX-5的HepG2細胞為對照組,野生型HepG2細胞為空白組,利用免疫印跡(Western blot)和逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測Smad4及血管內皮生長因子(VEGF)錶達的變化;用MTT法檢測細胞增殖及用FITC-Annexin V、碘化吡啶(propidiumiodide,PI)雙染後流式細胞儀(FCM)檢測細胞週期和凋亡情況,Westernblot檢測細胞週期素D1(Cyelin D1)錶達差異.結果 PFTX-5 Smad4瞬時轉染到肝癌細胞後,實驗組與對照組和空白組相比,Smad4 mRNA和蛋白錶達明顯上升(P<0.05),而VEGF mRNA和蛋白的錶達顯著降低(P<0.05).實驗組細胞CyclinD1錶達明顯下降(P<0.05),細胞週期時相分佈齣現閤成前期(G0/G1期)阻滯.實驗組細胞凋亡率明顯升高(P<0.01),增殖受到明顯抑製.結論 Smad4高錶達可能通過降低肝癌細胞中VEGF的錶達,抑製cyclinD1轉錄閤成,併誘導彊烈的G1期阻滯和細胞凋亡,對細胞的增殖有明顯的抑製作用,為進一步研究肝癌生長增殖機製提供瞭實驗基礎.
목적 연구억암기인Smad4대인간암세포주HepG2생장적영향,병탐토기작용궤제.방법 채용지질체순시전염법전염PFTX-5 Smad4질립지인간암세포주HepG2(실험조),이전염공질립PFTX-5적HepG2세포위대조조,야생형HepG2세포위공백조,이용면역인적(Western blot)화역전록취합매련반응(RT-PCR)검측Smad4급혈관내피생장인자(VEGF)표체적변화;용MTT법검측세포증식급용FITC-Annexin V、전화필정(propidiumiodide,PI)쌍염후류식세포의(FCM)검측세포주기화조망정황,Westernblot검측세포주기소D1(Cyelin D1)표체차이.결과 PFTX-5 Smad4순시전염도간암세포후,실험조여대조조화공백조상비,Smad4 mRNA화단백표체명현상승(P<0.05),이VEGF mRNA화단백적표체현저강저(P<0.05).실험조세포CyclinD1표체명현하강(P<0.05),세포주기시상분포출현합성전기(G0/G1기)조체.실험조세포조망솔명현승고(P<0.01),증식수도명현억제.결론 Smad4고표체가능통과강저간암세포중VEGF적표체,억제cyclinD1전록합성,병유도강렬적G1기조체화세포조망,대세포적증식유명현적억제작용,위진일보연구간암생장증식궤제제공료실험기출.
