胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2009年
11期
1007-1011
,共5页
王红建%白阳秋%熊晓鹏%戴云海%张强%姚惠香%朱金水
王紅建%白暘鞦%熊曉鵬%戴雲海%張彊%姚惠香%硃金水
왕홍건%백양추%웅효붕%대운해%장강%요혜향%주금수
Ezrin%RNA干扰%慢病毒%SGC-7901%胃癌
Ezrin%RNA榦擾%慢病毒%SGC-7901%胃癌
Ezrin%RNA간우%만병독%SGC-7901%위암
目的 构建ezrin基因RNA干扰慢病毒载体并建立ezrin基因稳定干扰的人胃癌SGC-7901细胞系,为ezrin基因的功能研究奠定基础.方法 设计ezrin基因特异性RNA干扰靶序列,与PHR-SIN-CSGW-H1a载体定向连接,构建PHR-SIN-CSGW-H1a真核入门表达载体.通过与psPAX2和PMD2.G载体进行重组,获得ezrin基因真核表达重组慢病毒表达载体.利用包装细胞293FT获得重组的慢病毒,感染人胃癌SGC-7901细胞.结果 成功构建PHR-Eai-psPAX2-PMD2.G真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒悬液的滴度>1×107U/L.RT-PCR、Western blot结果 表明,ezrin基因mRNA及蛋白表达显著降低.结论 成功构建人ezrin基因特异性的重组慢病毒干扰载体,获得ezrin基因稳定干扰的人胃癌SGC-7901细胞系.
目的 構建ezrin基因RNA榦擾慢病毒載體併建立ezrin基因穩定榦擾的人胃癌SGC-7901細胞繫,為ezrin基因的功能研究奠定基礎.方法 設計ezrin基因特異性RNA榦擾靶序列,與PHR-SIN-CSGW-H1a載體定嚮連接,構建PHR-SIN-CSGW-H1a真覈入門錶達載體.通過與psPAX2和PMD2.G載體進行重組,穫得ezrin基因真覈錶達重組慢病毒錶達載體.利用包裝細胞293FT穫得重組的慢病毒,感染人胃癌SGC-7901細胞.結果 成功構建PHR-Eai-psPAX2-PMD2.G真覈錶達慢病毒榦擾載體併穫得相應的慢病毒,病毒懸液的滴度>1×107U/L.RT-PCR、Western blot結果 錶明,ezrin基因mRNA及蛋白錶達顯著降低.結論 成功構建人ezrin基因特異性的重組慢病毒榦擾載體,穫得ezrin基因穩定榦擾的人胃癌SGC-7901細胞繫.
목적 구건ezrin기인RNA간우만병독재체병건립ezrin기인은정간우적인위암SGC-7901세포계,위ezrin기인적공능연구전정기출.방법 설계ezrin기인특이성RNA간우파서렬,여PHR-SIN-CSGW-H1a재체정향련접,구건PHR-SIN-CSGW-H1a진핵입문표체재체.통과여psPAX2화PMD2.G재체진행중조,획득ezrin기인진핵표체중조만병독표체재체.이용포장세포293FT획득중조적만병독,감염인위암SGC-7901세포.결과 성공구건PHR-Eai-psPAX2-PMD2.G진핵표체만병독간우재체병획득상응적만병독,병독현액적적도>1×107U/L.RT-PCR、Western blot결과 표명,ezrin기인mRNA급단백표체현저강저.결론 성공구건인ezrin기인특이성적중조만병독간우재체,획득ezrin기인은정간우적인위암SGC-7901세포계.
