湘南学院学报（医学版）
湘南學院學報（醫學版）
상남학원학보（의학판）
JOURNAL OF XIANGNAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
2期
1-5
,共5页
刘宇%吴喆%寻晓红%向阳%聂东宋
劉宇%吳喆%尋曉紅%嚮暘%聶東宋
류우%오철%심효홍%향양%섭동송
胸腺肽α1%融合表达%纯化
胸腺肽α1%融閤錶達%純化
흉선태α1%융합표체%순화
目的 建立一种低成本生产胸腺肽α1(Tα1)的方法.方法 采用融合表达方式表达Tα1基因,通过人工合成Tα1和弹性蛋白多肽(ELP)基因,构建Tα1-G-ELPn/pET41a(+),同时构建RimJ-pACYCDuet1载体,共转B121,采用自诱导表达培养基进行蛋白表达,表达蛋白通过变温自动聚合沉淀获得高纯度融合蛋白,将融合蛋白羟胺裂解,变温沉淀,收集上清,最终获得目标蛋白.结果 1L培养基最终获得纯度为98%的目标蛋白29.5 mg.结论 建立了一种不需色谱和亲和纯化的生产胸腺肽α1的方法.
目的 建立一種低成本生產胸腺肽α1(Tα1)的方法.方法 採用融閤錶達方式錶達Tα1基因,通過人工閤成Tα1和彈性蛋白多肽(ELP)基因,構建Tα1-G-ELPn/pET41a(+),同時構建RimJ-pACYCDuet1載體,共轉B121,採用自誘導錶達培養基進行蛋白錶達,錶達蛋白通過變溫自動聚閤沉澱穫得高純度融閤蛋白,將融閤蛋白羥胺裂解,變溫沉澱,收集上清,最終穫得目標蛋白.結果 1L培養基最終穫得純度為98%的目標蛋白29.5 mg.結論 建立瞭一種不需色譜和親和純化的生產胸腺肽α1的方法.
목적 건립일충저성본생산흉선태α1(Tα1)적방법.방법 채용융합표체방식표체Tα1기인,통과인공합성Tα1화탄성단백다태(ELP)기인,구건Tα1-G-ELPn/pET41a(+),동시구건RimJ-pACYCDuet1재체,공전B121,채용자유도표체배양기진행단백표체,표체단백통과변온자동취합침정획득고순도융합단백,장융합단백간알렬해,변온침정,수집상청,최종획득목표단백.결과 1L배양기최종획득순도위98%적목표단백29.5 mg.결론 건립료일충불수색보화친화순화적생산흉선태α1적방법.
