内蒙古农业大学学报（自然科学版）
內矇古農業大學學報（自然科學版）
내몽고농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF INNER MONGOLIA AGRICULTURAL UNIIVERSITY
2011年
2期
11-14
,共4页
牛伟萍%张丽颖%杨润军%张嘉保%赵志辉%张明军
牛偉萍%張麗穎%楊潤軍%張嘉保%趙誌輝%張明軍
우위평%장려영%양윤군%장가보%조지휘%장명군
梅花鹿%微卫星%遗传标记
梅花鹿%微衛星%遺傳標記
매화록%미위성%유전표기
梅花鹿基因组DNA经限制性内切酶MboI酶切,用1.5%的琼脂糖凝胶电泳回收400～1 000 bp的DNA片段,与MboI连接接头相连接,连接产物与生物素标记的(AC)15微卫星探针变性及退火,再通过链亲和素偶联磁珠亲和捕捉,经吸附,洗涤及洗脱,然后以洗脱产物为模版,以其中一个接头为引物进行PCR扩增,将扩增产物回收纯化并与pMD18-T载体相连接,转化大肠杆菌DH5a,构建梅花鹿(AC)n微卫星DNA富集文库,经测序分析表明该文库含重组克隆约为1 380个,其中计算得到阳性克隆率为82.9%.梅花鹿微卫星文库的建立将为一步进行梅花鹿基因组结构的分析、梅花鹿遗传连锁图谱的构建、分子进化和系统发育研究、标记辅助选择以及经济性状的QTL定位提供大量的微卫星标记.
梅花鹿基因組DNA經限製性內切酶MboI酶切,用1.5%的瓊脂糖凝膠電泳迴收400～1 000 bp的DNA片段,與MboI連接接頭相連接,連接產物與生物素標記的(AC)15微衛星探針變性及退火,再通過鏈親和素偶聯磁珠親和捕捉,經吸附,洗滌及洗脫,然後以洗脫產物為模版,以其中一箇接頭為引物進行PCR擴增,將擴增產物迴收純化併與pMD18-T載體相連接,轉化大腸桿菌DH5a,構建梅花鹿(AC)n微衛星DNA富集文庫,經測序分析錶明該文庫含重組剋隆約為1 380箇,其中計算得到暘性剋隆率為82.9%.梅花鹿微衛星文庫的建立將為一步進行梅花鹿基因組結構的分析、梅花鹿遺傳連鎖圖譜的構建、分子進化和繫統髮育研究、標記輔助選擇以及經濟性狀的QTL定位提供大量的微衛星標記.
매화록기인조DNA경한제성내절매MboI매절,용1.5%적경지당응효전영회수400～1 000 bp적DNA편단,여MboI련접접두상련접,련접산물여생물소표기적(AC)15미위성탐침변성급퇴화,재통과련친화소우련자주친화포착,경흡부,세조급세탈,연후이세탈산물위모판,이기중일개접두위인물진행PCR확증,장확증산물회수순화병여pMD18-T재체상련접,전화대장간균DH5a,구건매화록(AC)n미위성DNA부집문고,경측서분석표명해문고함중조극륭약위1 380개,기중계산득도양성극륭솔위82.9%.매화록미위성문고적건립장위일보진행매화록기인조결구적분석、매화록유전련쇄도보적구건、분자진화화계통발육연구、표기보조선택이급경제성상적QTL정위제공대량적미위성표기.
