CAJ | 학술논문

目的探讨microRNA(miR)-21-反义寡核苷酸(ASODN)对宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4基因表达、细胞增殖与凋亡的影响.方法宫颈鳞癌SiHa细胞分3组,采用LipofectamineTM2000转染试剂,miR-21调控组转染miR-21抑制剂的ASODN,miR-21抑制剂阴性对照的ASODN,空白对照组不转染.Cell Titer和荧光TUNEL分别检测转染前后SiHa细胞增殖和凋亡的变化,流式细胞仪分析细胞周期,实时RT-PCR检测miR-21和PDCD4mRNA水平表达,Western blot检测靶蛋白PDCD4表达.结果 AS-miR-21组与阴性、空白对照组相比,SiHa细胞生长明显抑制,而阴性和空白对照组比较无明显差异;细胞凋亡率分别为(9.7±0.52)%、(3.6±0.17)%和(3.4±0.36)%;细胞周期结果显示AS-miR-21组G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,与对照组间差异显著(P＜0.05);实时RT-PCR结果显示,miR-21表达下降而PDCD4表达升高.Western blot检测结果显示,PDCD4表达AS-miR-21组明显高于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05).结论 AS-miR-21可有效抑制miR-21在宫颈鳞癌SiHa细胞中的表达并上调PDCD4基因表达,发挥抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用.
목적 탐토microRNA(miR)-21-반의과핵감산(ASODN)대궁경린암SiHa세포중PDCD4기인표체、세포증식여조망적영향.방법 궁경린암SiHa세포분3조,채용LipofectamineTM2000전염시제,miR-21조공조전염miR-21억제제적ASODN,miR-21억제제음성대조적ASODN,공백대조조불전염.Cell Titer화형광TUNEL분별검측전염전후SiHa세포증식화조망적변화,류식세포의분석세포주기,실시RT-PCR검측miR-21화PDCD4mRNA수평표체,Western blot검측파단백PDCD4표체.결과 AS-miR-21조여음성、공백대조조상비,SiHa세포생장명현억제,이음성화공백대조조비교무명현차이;세포조망솔분별위(9.7±0.52)%、(3.6±0.17)%화(3.4±0.36)%;세포주기결과 현시AS-miR-21조G0/G1기세포명현증다,S기세포감소,여대조조간차이현저(P＜0.05);실시RT-PCR결과 현시,miR-21표체하강이PDCD4표체승고.Western blot검측결과 현시,PDCD4표체AS-miR-21조명현고우공백대조조화음성대조조(P＜0.05).결론 AS-miR-21가유효억제miR-21재궁경린암SiHa세포중적표체병상조PDCD4기인표체,발휘억제세포증식화유도세포조망적작용.