生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2011年
3期
203-208
,共6页
彭丹%周波%谢敏敏%唐冬英%赵小英%刘选明
彭丹%週波%謝敏敏%唐鼕英%趙小英%劉選明
팽단%주파%사민민%당동영%조소영%류선명
BnCOP1基因%pCold TF%原核表达%融合蛋白%蛋白纯化
BnCOP1基因%pCold TF%原覈錶達%融閤蛋白%蛋白純化
BnCOP1기인%pCold TF%원핵표체%융합단백%단백순화
COP1蛋白是植物光信号调节网络中介导光信号转导的一个关键因子,对植物生长发育起重要调控作用.通过RT-PCR方法从甘蓝型油菜中克隆BnCOP1基因编码区全长序列,并将其连接到冷诱导原核表达载体pCold TF上,构建原核重组表达载体pCold TF/BnCOP1,转化大肠杆菌BL(21)star.通过IPTG法低温诱导表达融合蛋白.结果表明,重组质粒在大肠杆菌中获得高效表达,融合蛋白分子质量约为128 kD,融合蛋白在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经亲和层析纯化和Western blotting检测证实获得了高纯度的重组蛋白,这些结果为进一步研究油菜BnCOP1的结构和功能奠定了基础.
COP1蛋白是植物光信號調節網絡中介導光信號轉導的一箇關鍵因子,對植物生長髮育起重要調控作用.通過RT-PCR方法從甘藍型油菜中剋隆BnCOP1基因編碼區全長序列,併將其連接到冷誘導原覈錶達載體pCold TF上,構建原覈重組錶達載體pCold TF/BnCOP1,轉化大腸桿菌BL(21)star.通過IPTG法低溫誘導錶達融閤蛋白.結果錶明,重組質粒在大腸桿菌中穫得高效錶達,融閤蛋白分子質量約為128 kD,融閤蛋白在上清液和包涵體中均有錶達,可溶性部分經親和層析純化和Western blotting檢測證實穫得瞭高純度的重組蛋白,這些結果為進一步研究油菜BnCOP1的結構和功能奠定瞭基礎.
COP1단백시식물광신호조절망락중개도광신호전도적일개관건인자,대식물생장발육기중요조공작용.통과RT-PCR방법종감람형유채중극륭BnCOP1기인편마구전장서렬,병장기련접도랭유도원핵표체재체pCold TF상,구건원핵중조표체재체pCold TF/BnCOP1,전화대장간균BL(21)star.통과IPTG법저온유도표체융합단백.결과표명,중조질립재대장간균중획득고효표체,융합단백분자질량약위128 kD,융합단백재상청액화포함체중균유표체,가용성부분경친화층석순화화Western blotting검측증실획득료고순도적중조단백,저사결과위진일보연구유채BnCOP1적결구화공능전정료기출.
