生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2011年
3期
195-202
,共8页
艾滋病毒%慢病毒载体%内含子%剪切%剪切保护
艾滋病毒%慢病毒載體%內含子%剪切%剪切保護
애자병독%만병독재체%내함자%전절%전절보호
通过在FUGW中克隆入各外源基因表达盒,如红系特异表达人β珠蛋白(HBG),或山羊乳腺特异表达人血清白蛋白(pBLG-ALB)等,研究以HIV-1为骨架的慢病毒载体FUGW在其假病毒的转录本中内含子的剪切情况.将慢病毒载体制备成假病毒后抽提其病毒RNA,通过逆转录和PCR验证其内含子剪切保留情况;同时,在相对应的慢病毒假病毒介导的转基因小鼠中也进行类似的PCR验证.在制备假病毒的转录过程中,其外源基因所携带的内含子在病毒所包含的基因组RNA中被部分保护不被剪切,且优先保护5′端的内含子.此现象正好与野生型HIV-1的保护顺序相反.
通過在FUGW中剋隆入各外源基因錶達盒,如紅繫特異錶達人β珠蛋白(HBG),或山羊乳腺特異錶達人血清白蛋白(pBLG-ALB)等,研究以HIV-1為骨架的慢病毒載體FUGW在其假病毒的轉錄本中內含子的剪切情況.將慢病毒載體製備成假病毒後抽提其病毒RNA,通過逆轉錄和PCR驗證其內含子剪切保留情況;同時,在相對應的慢病毒假病毒介導的轉基因小鼠中也進行類似的PCR驗證.在製備假病毒的轉錄過程中,其外源基因所攜帶的內含子在病毒所包含的基因組RNA中被部分保護不被剪切,且優先保護5′耑的內含子.此現象正好與野生型HIV-1的保護順序相反.
통과재FUGW중극륭입각외원기인표체합,여홍계특이표체인β주단백(HBG),혹산양유선특이표체인혈청백단백(pBLG-ALB)등,연구이HIV-1위골가적만병독재체FUGW재기가병독적전록본중내함자적전절정황.장만병독재체제비성가병독후추제기병독RNA,통과역전록화PCR험증기내함자전절보류정황;동시,재상대응적만병독가병독개도적전기인소서중야진행유사적PCR험증.재제비가병독적전록과정중,기외원기인소휴대적내함자재병독소포함적기인조RNA중피부분보호불피전절,차우선보호5′단적내함자.차현상정호여야생형HIV-1적보호순서상반.
