重组人KGF制备工艺和活性检测方法的建立
중조인KGF제비공예화활성검측방법적건립
Preparation of Recombinant Human Keratinocyte Growth Factor and Its Biological Activity Study
  • 万方数据
    生物技术 생물기술
    BIOTECHNOLOGY
    2011年 3期 47-50 ,共4页

    王希菊%李剑凤%孙丽霞%艾丽静%刘克玲%王克波%王红洁%薛彤彤%王晶翼

    왕희국%리검봉%손려하%애려정%류극령%왕극파%왕홍길%설동동%왕정익

    重组人角质细胞生长因子%毕赤酵母%高效表达%纯化%生物学活性 重組人角質細胞生長因子%畢赤酵母%高效錶達%純化%生物學活性
    중조인각질세포생장인자%필적효모%고효표체%순화%생물학활성
    目的:在毕赤酵母中实现了KGF的高效表达,并初步建立了生物学活性检测方法.方法:合成5'端缺失69个核苷酸的KGF基因序列,克隆入pPIC9并转化毕赤酵母菌株GS115中,经诱导表达.发酵液上清采用脱盐层析和阳离子交换层析进行分离纯化.利用貂肺上皮细胞(Mv-1-Lu)检测其生物学活性.结果:表达水平达到了110mg/L发酵液;表达产物经一步离子交换层析就能得到有效分离,总收率在50mg/L发酵液以上;纯化的rhKGF生物学活性与KepivanceTM相当.结论:rhKGF制备工艺和检测方法的建立将为该因子的规模化生产和进一步的临床应用提供良好基础.
    목적:재필적효모중실현료KGF적고효표체,병초보건립료생물학활성검측방법.방법:합성5'단결실69개핵감산적KGF기인서렬,극륭입pPIC9병전화필적효모균주GS115중,경유도표체.발효액상청채용탈염층석화양리자교환층석진행분리순화.이용초폐상피세포(Mv-1-Lu)검측기생물학활성.결과:표체수평체도료110mg/L발효액;표체산물경일보리자교환층석취능득도유효분리,총수솔재50mg/L발효액이상;순화적rhKGF생물학활성여KepivanceTM상당.결론:rhKGF제비공예화검측방법적건립장위해인자적규모화생산화진일보적림상응용제공량호기출.
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