生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
3期
23-29
,共7页
刘晓飞%余榕捷%王静静%苏航%黄霖%陈建苏
劉曉飛%餘榕捷%王靜靜%囌航%黃霖%陳建囌
류효비%여용첩%왕정정%소항%황림%진건소
PTD-Sox2%iPS%核转录因子%原核表达%FITC%FRET
PTD-Sox2%iPS%覈轉錄因子%原覈錶達%FITC%FRET
PTD-Sox2%iPS%핵전록인자%원핵표체%FITC%FRET
目的:制备带有穿膜肽的重组蛋白PTD-Sox2并对其活性进行鉴定.方法:通过将Sox2基因与穿膜肽基因PTD融合,利用原核表达载体pKYB进行表达,用Ni柱制备、纯化融合蛋白;用Western blot对其进行鉴定;用FITC标记PTD-Sox2,与CHO细胞孵育,检测其穿膜能力;用FRET法检测转录因子Sox2结合目的DNA的活性.结果:构建了带有穿膜肽重组PTD-Sox2的原核表达菌,制备并纯化PTD-Sox2,对其活性鉴定.结论:PTD-Sox2能够穿过细胞膜与核膜,进入细胞核内,穿膜效率为40.86%,并且可与目的DNA进行特异结合,为蛋白体外诱导iPS的产生奠定基础.
目的:製備帶有穿膜肽的重組蛋白PTD-Sox2併對其活性進行鑒定.方法:通過將Sox2基因與穿膜肽基因PTD融閤,利用原覈錶達載體pKYB進行錶達,用Ni柱製備、純化融閤蛋白;用Western blot對其進行鑒定;用FITC標記PTD-Sox2,與CHO細胞孵育,檢測其穿膜能力;用FRET法檢測轉錄因子Sox2結閤目的DNA的活性.結果:構建瞭帶有穿膜肽重組PTD-Sox2的原覈錶達菌,製備併純化PTD-Sox2,對其活性鑒定.結論:PTD-Sox2能夠穿過細胞膜與覈膜,進入細胞覈內,穿膜效率為40.86%,併且可與目的DNA進行特異結閤,為蛋白體外誘導iPS的產生奠定基礎.
목적:제비대유천막태적중조단백PTD-Sox2병대기활성진행감정.방법:통과장Sox2기인여천막태기인PTD융합,이용원핵표체재체pKYB진행표체,용Ni주제비、순화융합단백;용Western blot대기진행감정;용FITC표기PTD-Sox2,여CHO세포부육,검측기천막능력;용FRET법검측전록인자Sox2결합목적DNA적활성.결과:구건료대유천막태중조PTD-Sox2적원핵표체균,제비병순화PTD-Sox2,대기활성감정.결론:PTD-Sox2능구천과세포막여핵막,진입세포핵내,천막효솔위40.86%,병차가여목적DNA진행특이결합,위단백체외유도iPS적산생전정기출.
