医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2011年
6期
144-147
,共4页
张永乐%潘克女%武静%钟华燕%娄国强%杨劲
張永樂%潘剋女%武靜%鐘華燕%婁國彊%楊勁
장영악%반극녀%무정%종화연%루국강%양경
流感病毒A型%H1N1亚型%病毒%环介导等温扩增%实时荧光RT-PCR
流感病毒A型%H1N1亞型%病毒%環介導等溫擴增%實時熒光RT-PCR
류감병독A형%H1N1아형%병독%배개도등온확증%실시형광RT-PCR
目的 建立检测甲型H1N1病毒环介导等温扩增的方法(LAMP).方法 根据已公布的甲型H1N1流感病毒HA基因序列766～995bp的6个位点设计6条LAMP引物(2条内引物,2条外引物,2条环引物),优化并建立LAMP检测体系.并对36例确诊H1 N1感染患者和20例健康体检者的咽式子同时采用实时荧光RT-PCR(Real-time RT-PCR)和LAMP进行H1N1病毒核酸的检测.结果 所建立的甲型H1N1病毒核酸LAMP反应体系具有良好的特异性,采用该体系检测结果与Real -time RT-PCR检测结果一致,对H1N1核酸阳性的标本经LAMP扩增产物电泳图为阶梯状条带,健康对照标本未见条带产生.灵敏度试验,采用103复制的H1N1质粒进行10倍稀释后LAMP法仍能检出.特异性试验,20例体检标本经两种方法检测全阴性,对肺炎支原体和肺炎衣原体阳性标本采用该反应体系进行检测结果为阴性.结论 甲型H1N1病毒核酸LAMP检测方法简便、快捷,对实验仪器设备要求不高,适合各级实验室和现场快速诊断使用.
目的 建立檢測甲型H1N1病毒環介導等溫擴增的方法(LAMP).方法 根據已公佈的甲型H1N1流感病毒HA基因序列766～995bp的6箇位點設計6條LAMP引物(2條內引物,2條外引物,2條環引物),優化併建立LAMP檢測體繫.併對36例確診H1 N1感染患者和20例健康體檢者的嚥式子同時採用實時熒光RT-PCR(Real-time RT-PCR)和LAMP進行H1N1病毒覈痠的檢測.結果 所建立的甲型H1N1病毒覈痠LAMP反應體繫具有良好的特異性,採用該體繫檢測結果與Real -time RT-PCR檢測結果一緻,對H1N1覈痠暘性的標本經LAMP擴增產物電泳圖為階梯狀條帶,健康對照標本未見條帶產生.靈敏度試驗,採用103複製的H1N1質粒進行10倍稀釋後LAMP法仍能檢齣.特異性試驗,20例體檢標本經兩種方法檢測全陰性,對肺炎支原體和肺炎衣原體暘性標本採用該反應體繫進行檢測結果為陰性.結論 甲型H1N1病毒覈痠LAMP檢測方法簡便、快捷,對實驗儀器設備要求不高,適閤各級實驗室和現場快速診斷使用.
목적 건립검측갑형H1N1병독배개도등온확증적방법(LAMP).방법 근거이공포적갑형H1N1류감병독HA기인서렬766～995bp적6개위점설계6조LAMP인물(2조내인물,2조외인물,2조배인물),우화병건립LAMP검측체계.병대36례학진H1 N1감염환자화20례건강체검자적인식자동시채용실시형광RT-PCR(Real-time RT-PCR)화LAMP진행H1N1병독핵산적검측.결과 소건립적갑형H1N1병독핵산LAMP반응체계구유량호적특이성,채용해체계검측결과여Real -time RT-PCR검측결과일치,대H1N1핵산양성적표본경LAMP확증산물전영도위계제상조대,건강대조표본미견조대산생.령민도시험,채용103복제적H1N1질립진행10배희석후LAMP법잉능검출.특이성시험,20례체검표본경량충방법검측전음성,대폐염지원체화폐염의원체양성표본채용해반응체계진행검측결과위음성.결론 갑형H1N1병독핵산LAMP검측방법간편、쾌첩,대실험의기설비요구불고,괄합각급실험실화현장쾌속진단사용.
