军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2011年
7期
517-520
,共4页
高博%贾帅争%彭剑淳%王怡%詹林盛%许金波
高博%賈帥爭%彭劍淳%王怡%詹林盛%許金波
고박%가수쟁%팽검순%왕이%첨림성%허금파
丙型肝炎病毒(HCV)%RNA%荧光素酶类,萤火虫%转染
丙型肝炎病毒(HCV)%RNA%熒光素酶類,螢火蟲%轉染
병형간염병독(HCV)%RNA%형광소매류,형화충%전염
目的 比较和优化DMRIE-C、Lipofectamine2000和TransMessenger 3种转染试剂的转染效率,选择适合建立丙型肝炎病毒(HCV)复制子或感染克隆的转染试剂和条件.方法 将含有萤火虫荧光素酶报告基因的HCV RNA,分别通过上述3种转染试剂转染Huh7和Huh7.5.1细胞系,于转染24 h后裂解细胞,测定荧光素酶活性.2~3周后,结晶紫染色细胞集落.结果 在Huh7和Huh7.5.1细胞中,DMRIE-C比Lipofectamine2000和TransMessenger的转染效率高.在Huh7细胞中,4 μl DMRIE-C 转染试剂组的荧光素酶活性比其他组高(P＜0.05).在Huh7.5.1细胞中,3 μl DMRIE-C 转染试剂组的荧光素酶活性比其他组高(P＜0.05).在细胞集落形成实验中,DMRIE-C组的细胞克隆数多于其他两种转染试剂组.结论 在Huh7和Huh7.5.1细胞中,DMRIE-C比Lipofectamine2000和TransMessenger的转染效率高.当建立HCV复制子或感染克隆试验时,既要选择合适的RNA转染试剂,又要考虑细胞生长状态的影响.
目的 比較和優化DMRIE-C、Lipofectamine2000和TransMessenger 3種轉染試劑的轉染效率,選擇適閤建立丙型肝炎病毒(HCV)複製子或感染剋隆的轉染試劑和條件.方法 將含有螢火蟲熒光素酶報告基因的HCV RNA,分彆通過上述3種轉染試劑轉染Huh7和Huh7.5.1細胞繫,于轉染24 h後裂解細胞,測定熒光素酶活性.2~3週後,結晶紫染色細胞集落.結果 在Huh7和Huh7.5.1細胞中,DMRIE-C比Lipofectamine2000和TransMessenger的轉染效率高.在Huh7細胞中,4 μl DMRIE-C 轉染試劑組的熒光素酶活性比其他組高(P＜0.05).在Huh7.5.1細胞中,3 μl DMRIE-C 轉染試劑組的熒光素酶活性比其他組高(P＜0.05).在細胞集落形成實驗中,DMRIE-C組的細胞剋隆數多于其他兩種轉染試劑組.結論 在Huh7和Huh7.5.1細胞中,DMRIE-C比Lipofectamine2000和TransMessenger的轉染效率高.噹建立HCV複製子或感染剋隆試驗時,既要選擇閤適的RNA轉染試劑,又要攷慮細胞生長狀態的影響.
목적 비교화우화DMRIE-C、Lipofectamine2000화TransMessenger 3충전염시제적전염효솔,선택괄합건립병형간염병독(HCV)복제자혹감염극륭적전염시제화조건.방법 장함유형화충형광소매보고기인적HCV RNA,분별통과상술3충전염시제전염Huh7화Huh7.5.1세포계,우전염24 h후렬해세포,측정형광소매활성.2~3주후,결정자염색세포집락.결과 재Huh7화Huh7.5.1세포중,DMRIE-C비Lipofectamine2000화TransMessenger적전염효솔고.재Huh7세포중,4 μl DMRIE-C 전염시제조적형광소매활성비기타조고(P＜0.05).재Huh7.5.1세포중,3 μl DMRIE-C 전염시제조적형광소매활성비기타조고(P＜0.05).재세포집락형성실험중,DMRIE-C조적세포극륭수다우기타량충전염시제조.결론 재Huh7화Huh7.5.1세포중,DMRIE-C비Lipofectamine2000화TransMessenger적전염효솔고.당건립HCV복제자혹감염극륭시험시,기요선택합괄적RNA전염시제,우요고필세포생장상태적영향.
