实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2011年
13期
2321-2324
,共4页
吴共发%胡洁%王雅娟%赵海燕%何楠%韩慧霞
吳共髮%鬍潔%王雅娟%趙海燕%何楠%韓慧霞
오공발%호길%왕아연%조해연%하남%한혜하
结直肠肿瘤%T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1%RNA干扰%上皮-间质转化
結直腸腫瘤%T淋巴瘤侵襲轉移誘導因子1%RNA榦擾%上皮-間質轉化
결직장종류%T림파류침습전이유도인자1%RNA간우%상피-간질전화
目的:探讨RNAi技术沉默Tiam1对大肠癌LoVo细胞上皮-间质转化(EMT)的影响.方法:应用RNAi技术将Tiam1的特异性干扰片段转染处理LoVo细胞,采用Real time-RT PCR方法检测Tiam1表达水平和沉默前后LoVo细胞E-cadherin、Vimentin、RhoA、RhoC、Rac1的表达水平;扫描电镜、透射电镜,HE染色观察细胞结构及形态变化;考马斯亮蓝染色观察细胞骨架变化.结果:与对照组比较,RNAi组的Tiam1 mRNA表达水平明显降低;RNAi组的E-cadherin mRNA表达水平比对照组上调,差异具有统计学意义(P ＜ 0.05),RNAi组Vimentin、RhoA、RhoC、Rac1的mRNA表达水平与对照组比较差异均无显著性(全部P ＞ 0.05);扫描电镜显示RNAi组细胞胞体比对照组变圆、细胞突起明显变短或消失,丝状微绒毛减少,变为扁平盘状突起;透射电镜显示RNAi组细胞表面丝状微绒毛比对照组有较明显减少;HE染色显示对照组细胞散在生长,呈细长梭形,RNAi组细胞生长较集中,呈圆形或类圆形;RNAi组细胞质中丝网状的骨架蛋白结构及点状肌动蛋白小体比对照组减少.结论:沉默Tiam1能在一定程度上使已发生EMT的大肠癌细胞出现上皮表型及降低其迁移运动能力,对EMT有一定程度的逆转作用,推测Tiam1通过诱导EMT来促进大肠癌侵袭、转移,至于其确切机制尚待进一步研究.
目的:探討RNAi技術沉默Tiam1對大腸癌LoVo細胞上皮-間質轉化(EMT)的影響.方法:應用RNAi技術將Tiam1的特異性榦擾片段轉染處理LoVo細胞,採用Real time-RT PCR方法檢測Tiam1錶達水平和沉默前後LoVo細胞E-cadherin、Vimentin、RhoA、RhoC、Rac1的錶達水平;掃描電鏡、透射電鏡,HE染色觀察細胞結構及形態變化;攷馬斯亮藍染色觀察細胞骨架變化.結果:與對照組比較,RNAi組的Tiam1 mRNA錶達水平明顯降低;RNAi組的E-cadherin mRNA錶達水平比對照組上調,差異具有統計學意義(P ＜ 0.05),RNAi組Vimentin、RhoA、RhoC、Rac1的mRNA錶達水平與對照組比較差異均無顯著性(全部P ＞ 0.05);掃描電鏡顯示RNAi組細胞胞體比對照組變圓、細胞突起明顯變短或消失,絲狀微絨毛減少,變為扁平盤狀突起;透射電鏡顯示RNAi組細胞錶麵絲狀微絨毛比對照組有較明顯減少;HE染色顯示對照組細胞散在生長,呈細長梭形,RNAi組細胞生長較集中,呈圓形或類圓形;RNAi組細胞質中絲網狀的骨架蛋白結構及點狀肌動蛋白小體比對照組減少.結論:沉默Tiam1能在一定程度上使已髮生EMT的大腸癌細胞齣現上皮錶型及降低其遷移運動能力,對EMT有一定程度的逆轉作用,推測Tiam1通過誘導EMT來促進大腸癌侵襲、轉移,至于其確切機製尚待進一步研究.
목적:탐토RNAi기술침묵Tiam1대대장암LoVo세포상피-간질전화(EMT)적영향.방법:응용RNAi기술장Tiam1적특이성간우편단전염처리LoVo세포,채용Real time-RT PCR방법검측Tiam1표체수평화침묵전후LoVo세포E-cadherin、Vimentin、RhoA、RhoC、Rac1적표체수평;소묘전경、투사전경,HE염색관찰세포결구급형태변화;고마사량람염색관찰세포골가변화.결과:여대조조비교,RNAi조적Tiam1 mRNA표체수평명현강저;RNAi조적E-cadherin mRNA표체수평비대조조상조,차이구유통계학의의(P ＜ 0.05),RNAi조Vimentin、RhoA、RhoC、Rac1적mRNA표체수평여대조조비교차이균무현저성(전부P ＞ 0.05);소묘전경현시RNAi조세포포체비대조조변원、세포돌기명현변단혹소실,사상미융모감소,변위편평반상돌기;투사전경현시RNAi조세포표면사상미융모비대조조유교명현감소;HE염색현시대조조세포산재생장,정세장사형,RNAi조세포생장교집중,정원형혹류원형;RNAi조세포질중사망상적골가단백결구급점상기동단백소체비대조조감소.결론:침묵Tiam1능재일정정도상사이발생EMT적대장암세포출현상피표형급강저기천이운동능력,대EMT유일정정도적역전작용,추측Tiam1통과유도EMT래촉진대장암침습、전이,지우기학절궤제상대진일보연구.
