安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2013年
8期
858-863
,共6页
李振兴%云云%邱欢%朱童娜%吴璇%黄升海
李振興%雲雲%邱歡%硃童娜%吳璇%黃升海
리진흥%운운%구환%주동나%오선%황승해
呼吸道合胞病毒%Toll样受体3%Toll样受体7%核转录因子%小鼠小胶质细胞
呼吸道閤胞病毒%Toll樣受體3%Toll樣受體7%覈轉錄因子%小鼠小膠質細胞
호흡도합포병독%Toll양수체3%Toll양수체7%핵전록인자%소서소효질세포
respiratory syncytial virus%Toll-like receptor 3%Toll-like receptor 7%nuclear factor-kappa B%BV2
目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应.方法 ①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白.②分别于感染4、8、12、16、24和36 h收集细胞,以未感染细胞作为正常组.用TRIzol提取细胞总RNA,通过半定量RT-PCR法检测TLR3、TLR7的mRNA转录水平的变化.③Western blot法分别检测感染4、8、12、16、24和36 h后的细胞内核转录因子(NF-κB)蛋白水平的变化.④ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化.结果 ①荧光显微镜下可以见到FITC标记RSV-F蛋白的绿色荧光随感染时间的延长而增强.②TLR3、TLR7在感染RSV后mRNA水平在观察的时间内表达均升高并呈时间依赖性关系.③各感染时间点NF-κB蛋白水平表达均升高并呈时间依赖性关系.④感染RSV后,细胞上清液中TNF-α含量均升高并呈时间依赖性关系.结论 RSV感染BV2后可以上调TLR3、TLR7,从而使下游细胞炎性因子TNF-α分泌升高,过度的炎性作用可能与神经系统症状的发生相关.
目的 探討呼吸道閤胞病毒(RSV)感染小鼠小膠質細胞(BV2)後,Toll樣受體3(TLR3)和Toll樣受體7(TLR7)的活化及其介導的炎性反應.方法 ①RSV體外感染BV2,利用免疫熒光技術分彆在12、24和36 h檢測細胞內RSV-F蛋白.②分彆于感染4、8、12、16、24和36 h收集細胞,以未感染細胞作為正常組.用TRIzol提取細胞總RNA,通過半定量RT-PCR法檢測TLR3、TLR7的mRNA轉錄水平的變化.③Western blot法分彆檢測感染4、8、12、16、24和36 h後的細胞內覈轉錄因子(NF-κB)蛋白水平的變化.④ELISA法檢測細胞上清液中腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量的變化.結果 ①熒光顯微鏡下可以見到FITC標記RSV-F蛋白的綠色熒光隨感染時間的延長而增彊.②TLR3、TLR7在感染RSV後mRNA水平在觀察的時間內錶達均升高併呈時間依賴性關繫.③各感染時間點NF-κB蛋白水平錶達均升高併呈時間依賴性關繫.④感染RSV後,細胞上清液中TNF-α含量均升高併呈時間依賴性關繫.結論 RSV感染BV2後可以上調TLR3、TLR7,從而使下遊細胞炎性因子TNF-α分泌升高,過度的炎性作用可能與神經繫統癥狀的髮生相關.
목적 탐토호흡도합포병독(RSV)감염소서소효질세포(BV2)후,Toll양수체3(TLR3)화Toll양수체7(TLR7)적활화급기개도적염성반응.방법 ①RSV체외감염BV2,이용면역형광기술분별재12、24화36 h검측세포내RSV-F단백.②분별우감염4、8、12、16、24화36 h수집세포,이미감염세포작위정상조.용TRIzol제취세포총RNA,통과반정량RT-PCR법검측TLR3、TLR7적mRNA전록수평적변화.③Western blot법분별검측감염4、8、12、16、24화36 h후적세포내핵전록인자(NF-κB)단백수평적변화.④ELISA법검측세포상청액중종류배사인자α(TNF-α)함량적변화.결과 ①형광현미경하가이견도FITC표기RSV-F단백적록색형광수감염시간적연장이증강.②TLR3、TLR7재감염RSV후mRNA수평재관찰적시간내표체균승고병정시간의뢰성관계.③각감염시간점NF-κB단백수평표체균승고병정시간의뢰성관계.④감염RSV후,세포상청액중TNF-α함량균승고병정시간의뢰성관계.결론 RSV감염BV2후가이상조TLR3、TLR7,종이사하유세포염성인자TNF-α분비승고,과도적염성작용가능여신경계통증상적발생상관.
