中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
2期
236-241
,共6页
张俊霞%张腾腾%张利军%王蓓蓓%魏俊燕%王海伟%沈炳玲%张丽莙
張俊霞%張騰騰%張利軍%王蓓蓓%魏俊燕%王海偉%瀋炳玲%張麗莙
장준하%장등등%장리군%왕배배%위준연%왕해위%침병령%장려군
肺炎衣原体%Rac1 GTP结合蛋白%磷脂酰肌醇3-激酶%血管平滑肌细胞%细胞迁移
肺炎衣原體%Rac1 GTP結閤蛋白%燐脂酰肌醇3-激酶%血管平滑肌細胞%細胞遷移
폐염의원체%Rac1 GTP결합단백%린지선기순3-격매%혈관평활기세포%세포천이
目的:研究Rac1活化在肺炎衣原体(C.pn)感染诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移中的作用及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)对其活化的影响.方法:谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-p21活化激酶1 p21结合结构域(PBD)即GST-PBD重组质粒转化感受态细菌,诱导融合蛋白表达并纯化;GST-pull down实验检测C.pn感染VSMCs后Rac1活性的变化;PI3K特异性抑制剂LY294002 (25 μmol/L)预处理VSMCs,GST-pull down实验检测Rac1活性的变化;Rac1特异性抑制剂NSC23766(50 μmol/L)预处理VSMCs,wound-healing 实验和Transwell 实验观察VSMCs迁移能力的变化.结果:重组质粒转化感受态细菌后,经诱导表达和纯化,得到足量有效的GST-PBD融合蛋白;GST-pull down实验结果显示,C.pn感染VSMCs后Rac1活性增强且显著高于正常对照组(P<0.05);LY294002预处理VSMC后,C.pn感染诱导的Rac1活性明显下降(P<0.05);细胞迁移实验结果显示,NSC23766预处理的 C.pn感染组细胞迁移能力明显低于单纯感染组(P<0.05).结论:C.pn感染可能通过PI3K激活Rac1,从而诱导VSMCs迁移.
目的:研究Rac1活化在肺炎衣原體(C.pn)感染誘導血管平滑肌細胞(VSMCs)遷移中的作用及燐脂酰肌醇3-激酶(PI3K)對其活化的影響.方法:穀胱甘肽巰基轉移酶(GST)-p21活化激酶1 p21結閤結構域(PBD)即GST-PBD重組質粒轉化感受態細菌,誘導融閤蛋白錶達併純化;GST-pull down實驗檢測C.pn感染VSMCs後Rac1活性的變化;PI3K特異性抑製劑LY294002 (25 μmol/L)預處理VSMCs,GST-pull down實驗檢測Rac1活性的變化;Rac1特異性抑製劑NSC23766(50 μmol/L)預處理VSMCs,wound-healing 實驗和Transwell 實驗觀察VSMCs遷移能力的變化.結果:重組質粒轉化感受態細菌後,經誘導錶達和純化,得到足量有效的GST-PBD融閤蛋白;GST-pull down實驗結果顯示,C.pn感染VSMCs後Rac1活性增彊且顯著高于正常對照組(P<0.05);LY294002預處理VSMC後,C.pn感染誘導的Rac1活性明顯下降(P<0.05);細胞遷移實驗結果顯示,NSC23766預處理的 C.pn感染組細胞遷移能力明顯低于單純感染組(P<0.05).結論:C.pn感染可能通過PI3K激活Rac1,從而誘導VSMCs遷移.
목적:연구Rac1활화재폐염의원체(C.pn)감염유도혈관평활기세포(VSMCs)천이중적작용급린지선기순3-격매(PI3K)대기활화적영향.방법:곡광감태구기전이매(GST)-p21활화격매1 p21결합결구역(PBD)즉GST-PBD중조질립전화감수태세균,유도융합단백표체병순화;GST-pull down실험검측C.pn감염VSMCs후Rac1활성적변화;PI3K특이성억제제LY294002 (25 μmol/L)예처리VSMCs,GST-pull down실험검측Rac1활성적변화;Rac1특이성억제제NSC23766(50 μmol/L)예처리VSMCs,wound-healing 실험화Transwell 실험관찰VSMCs천이능력적변화.결과:중조질립전화감수태세균후,경유도표체화순화,득도족량유효적GST-PBD융합단백;GST-pull down실험결과현시,C.pn감염VSMCs후Rac1활성증강차현저고우정상대조조(P<0.05);LY294002예처리VSMC후,C.pn감염유도적Rac1활성명현하강(P<0.05);세포천이실험결과현시,NSC23766예처리적 C.pn감염조세포천이능력명현저우단순감염조(P<0.05).결론:C.pn감염가능통과PI3K격활Rac1,종이유도VSMCs천이.
